剪碎法网搓法研磨法实验方法原理机械法分散实体组织。用手术剪刀剪碎组织、用锋利的解剖刀剁碎组织或用匀浆器制成组织匀浆，再用细注射针头抽吸细胞或用 300 日尼龙网滤出单细胞悬液；采用网搓法也能获得大量细胞。机械法易造成细胞碎片和细胞团块，所以常与其他方法配合使用。实验材料组织 酶 ......阅读全文 识别特异性酪氨酸磷酸化多肽抗体的制备 实验步骤基 本 方 案 1 多克隆抗磷酸肽抗体的制备材料B S A -琼 脂 糖 亲 和 基 质（Sigma) 填 装（如辅助方案 2 ) 于柱床体积IOml的层析柱磷酸化酪氨酸亲和基质层析柱（IOml 柱床体积；见辅助方案3)磷酸肽-B S A 偶联物免疫家兔的粗制血清PB S /叠氮钠.•含有0 流式细胞仪常用的几种检测方法 流式细胞仪常用的几种检测方法一、测定用乙醇固定的DNA的含量1 、培养细胞的 DNA 含量的测定制备单细胞悬液于200μl的PBS缓冲液中；加入2ml预冷的70%乙醇，4℃保存；附 : 细胞固定的一般步骤1) 取单细胞悬液1～2×106 个细胞于PBS（PH=7.2）缓冲液中 显微注射法建立转基因小鼠模型的操作流程 实验概要本实验详细介绍了显微注射法建立转基因小鼠模型的操作流程。实验原理转基因小鼠制备的基本原理是将改建后的目的基因(或基因组片段)用显微注射法注入供体小鼠的受精卵(或着床前胚胎细胞)，然后将此受精卵(或着床前胚胎细胞)再植入受体动物的输卵管(或子宫)中，使其发育成携带有外源基因的转基因动物，通过分 RNA实验和方案新手必读（六） 一些样本来源在其RNA或内含物方面存在着显著不同，可能导致RNA的分离和分析过程出现问题。当操作这些样本来源时需要一些特别注意事项。本节将针对大量不同样本来源的操作进行探讨。植物从植物材料中分离RNA会遇到一些特殊困难，常规技术在用于植物样本之前一般要先经过条件优化。一些植物代谢产物的化学性质与核酸 IHC/ICC/IF实验前需要知道的几个要点 IHC/ICC/IF ,傻傻分不清楚？它们都是用于定位检测抗原表达的免疫检测技术，由于技术相对简单且直观，在科研和临床上都得到了大量使用。但是影响最终检测效果的变量非常多；每一个具体的检测都会遇到多个需要调整的变量。具体到选择何种方法来保存组织样本；固定标本该用醇还是醛；如何选择最合适的一抗；抗原修 免疫印迹法实验原理和常见故障分析 免疫印迹法（western blot） 原理： 通过电泳区分不同的组分，并转移至固相支持物，通过特异性试剂（抗体）作为探针，对靶物质进行检测，蛋白质的Western印迹技术结合了凝胶电泳的高分辨率和固相免疫测定的特异敏感等多种特点，可检测到低至1～5n 细胞组分的分析方法——定量细胞化学分析技术-1 一.流式细胞光度术－单细胞悬液染色标本的多信息分析法1.概述 流式细胞光度计(flow cytometry)可定量地测定某一细胞中的DNA、RNA或某一特异蛋白的含量，以及细胞群体中上述成分含量不同的细胞的数量，特别是它还可将某一特异染色的细胞从数以万计的细胞群体中分离出来，以及将DNA含量不同的 大咖云集 2019中国实验室发展大会演讲嘉宾详细介绍出炉 将于2019年3月27日-28日 在北京·国家会议中心 与第十七届CISILE科仪展同期举办！ 将有哪些业内大咖出席会议？ 议题有哪些？日程怎么安排？ 企业的参与情况如何？ 本文带给你最全最新的大会资讯演讲嘉宾介绍魏复盛中国工程院院士 魏复盛，1938年1月19日出生于成都简阳，环 大咖云集 2019中国实验室发展大会演讲嘉宾详细介绍出炉 将于2019年3月27日-28日 在北京·国家会议中心 与第十七届CISILE科仪展同期举办！ 将有哪些业内大咖出席会议？ 议题有哪些？日程怎么安排？ 企业的参与情况如何？ 本文带给你最全最新的大会资讯演讲嘉宾介绍魏复盛中国工程院院士 魏复盛，1938年1月19日出生于成都简阳，环 细胞生物基本方法：上皮细胞培养 上皮细胞培养1）表皮细胞培养1．取材：取外科植皮或手术残余皮肤小块，以角化层薄者为佳，早产流产儿皮肤更好，切成0.5～1平方厘米小块。2．EDTA处理：先置入0.02％EDTA中室温置5分钟。3．冷消化：换入0.25％胰蛋白酶中，置4℃过夜。4．分离：取出皮肤，用血管钳或镊子把表皮与真皮层分开。5． CD34阳性细胞计数-2 其他研究组也对影响计数结果的因素进行了广泛的检查，如通过提供统一试剂或发行标准分析方案来进行。尽管这些研究减少了一些检测差异，但要进一步地提高实验的精确性需对各个检测中心进行全面的培训并发展标准的计数方案。此项工作由Nordic Myeloma研究组广泛开展，他们组织了两个协作组来制定计数标准方案并 蛋白质提取与纯化技术（一） 选择材料及预处理以蛋白质和结构与功能为基础，从分子水平上认识生命现象，已经成为现代生物学发展的主要方向，研究蛋白质，首先要得到高度纯化并具有生物活性的目的物质。蛋白质的制备工作涉及物理、化学和生物等各方面知识，但基本原理不外乎两方面。一是得用混合物中几个组分分配率的差别，把它们分配到可用机械方法分离 蛋白质的蛋白质的提取技术 选择材料及预处理 以蛋白质和结构与功能为基础，从分子水平上认识生命现象，已经成为现代生物学发展的主要方向，研究蛋白质，首先要得到高度纯化并具有生物活性的目的物质。蛋白质的制备工作涉及物理、化学和生物等各方面知识，但基本原理不外乎两方面。一是得用混合物中几个组分分配率的差别，把它们分配到 Western Blot 相关技术操作与原理-1 【实验原理】：Western Blot印迹方法，又称为免疫印记，是将获得的蛋白质样品通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，对不同分子量的蛋白质进行分离，并通过转移电泳将凝胶上分离到的蛋白质转印至固相支持物（NC膜或PVDF膜）上，用抗靶蛋白的非标记抗体（一抗）与转印后膜上的靶蛋白进 蛋白质浓缩和溶质的去除实验 预计在新奇的一级分子和生物仿制药实体方面将会有突出的增长。一些进步的是改良的分析、开发和相互作用。现在已有许多用于去除關的方法，包括冻干、反向萃取、溶质析出，precipitation、透析(溶剂交换） 、超滤和层析技术。值得注意的是，在众多微和设备发展的支持下，小型化和高通量的蛋白质分析取得了极大 检测实验室的实验用水知识汇总 所谓实验，是指对现象所推测的假设加以验证的动作。假设能否被证明为真理，与假设能否具有再现性的结果至关重要。实验的再现性除了要有良好的技巧，还受到所用化学试剂的纯度和分析仪器的精密度的影响。实验中用来配置溶液的化学试剂，及所使用的水的纯度也非常重要。假设水中污染物对实验检测会造成影响，就必须去除这 工信部印发产业关键共性技术发展指南 包含色谱和传感器 分析测试百科网讯 近日，工业和信息化部组织修订了《产业关键共性技术发展指南（2015年）》（以下简称指南），并印发。指南在仪器仪表类中对色谱类分析仪器的关键制造技术、工业控制巨磁电阻传感器微型化和集成化技术、硅基压力传感器无引线封装制造技术、DCS/PLC冗余设计关键技术等做出了技术内容指南，如 超声波细胞破碎仪工作原理及应用领域 所谓的超声波一般是指频率范围在20k～10MHz的声波，其在化学领域的应用动力主要来源于超声波空化效应。超声波能量在液体产生的空化效应，伴随着强烈的冲击波和速度高于100m/s的微射流，冲击波和微射流的高梯度剪切可在水溶液中产生羟基自由基，相应产生的物理学效应主要是机械效应(冲击波，微射流等)、热效 植物钙离子浓度比色法定量检测试剂盒使用说明 主要用途植物钙离子浓度比色法定量检测试剂是一种旨在通过邻甲酚酞络合酮，在碱性条件下与钙离子反应产生紫蓝色复合物，在分光光度仪下通过吸光峰值的变化，即采用比色法来测定样品中总钙离子浓度的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适合于各种植物组织，包括种子（seed）、叶片（leaf 了解临床质谱前沿技术 2019国际临床质谱会分会集锦 分析测试百科网讯 2019年9月16日，2019国际临床质谱会议MSCD在宁波大学盛大召开（相关报道：质谱与临床的交叉 2019国际临床质谱会MSCD在宁波大学召开）。精彩的大会报告后，分会场中，临床质谱的国内外大咖纷纷带来关于临床质谱的新技术和新方法。分析测试百科网作为合作媒体参加并报道了此次 低密度脂蛋白胆固醇的检测方法与标准化研究 众多流行病学、遗传学与临床研究证实，血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平与动脉粥样硬化(AS)、冠心病(CHD)的发生率呈正相关，通常以高LDL-C作为CHD的首要致病因素。美国国家胆固醇教育计划(NCEP)成人治疗专业组规定以LDL-C水平作为高脂血症的分类与治疗基础及需要达到的治疗目标。作者 盘点2014年度十大改变世界的革命性技术 基因编辑更快更准更简单 1973年，斯坦利•N•科恩(Stanley N. Cohen)和赫伯特•W•博耶(Herbert W. Boyer)找到了改变生物体基因组的方法，成功将蛙的DNA插入到细菌中。20世纪70年代末，博耶的基因泰克(Genetech)公司对大肠杆菌进行基因改造，使其带有一 2014年9月24日，赛默飞世尔科技亮相于上海新国际博览中心召开的2014慕尼黑上海分析生化展，隆重推出了赛默飞移动检测解决方案并召开新闻发布会，赛默飞中国 蛋白质的Western blot印迹分析 一、原理 一个基因表达的最终产物是产生相应的蛋白，因此检测蛋白是测定基因表达的主要标志。 原理：Western Blotting 是将获得的蛋白质样品通过SDS-聚丙稀酰胺凝胶电泳，对不同分子量的蛋白质进行分离；并通过转移电泳将凝胶上分离到的蛋白质转印至固相支持 Western Blot，如何成功优化？ Western Blot 现在仍然是检测和分离蛋白最常用的一种实验方法，但是要想得到较好的结果并不容易，只有找到合适的实验条件并进行优化，才能以更少的时间得到更多的结果，达到事半功倍的效果！下面是 R D Systems 品牌为您推荐的免疫印迹优化步骤和实验涉及参考数据：一抗浓度对实 如何获得精准的Western Blot实验结果？（一） 蛋白质免疫印迹杂交实验（Western Blotting）是成熟 mRNA 翻译指导蛋白质合成量分析检测手段中最经典和最广泛为业界认可的一种,也是论文中最常见的数据呈现形式之一。虽然Western Blot实验原理比较简单，但是实验耗时长、步骤繁琐和实验结果重复性差，导致刚进实验室的小伙伴们 免疫酶细胞化学实验技术-2 （四）染色原理及步骤 1．基本原理 酶标抗体与荧光色素标记抗体的染色相同，亦分直接法和间接法。直接法是将酶直接标记在每一抗体上，间接法是将酶标记在第二抗体上，检测组织细胞内的特定抗原物质。间接法所用的第一抗体是对组织细胞内某种抗原的特异性抗体（80%～90%的抗血清系由家兔制得，而绝大数单克隆 Southern印迹杂交 实验原理核酸分子杂交技术是分子生物学领域中zui常用的具体方法之一。其基本原理是：具有一定同源性的两条核酸单链在一定的条件下，可按碱基互补的原则形成双链，此杂交过程是高度特异的。由于核酸分子的高度特异性及检测方法的灵敏性，综合凝胶电泳和核酸内切限制酶分析的结果，便可绘制出DNA分子的限制 DNA提取纯化新技术浅谈——核酸电泳纯化技术 核酸的提取和纯化是法医DNA物证检验的关键技术之一，目前实验室最常用的方法包括核酸纯化柱（Spin column）磁珠法和clean-up系统，磁珠法由于操作简便、快速，能够提取到高纯度的核酸DNA,并且可以自动化，因此成为目前法医DNA实验室核酸提取纯化的主要手段。但磁珠法由于磁珠吸附DN WB注意这些问题，新手也能做出满意结果！ Western blot（WB）是检测蛋白质及蛋白质翻译后修饰的经典方法，可在简单或复杂的生物样品中提供有关靶蛋白的半定量或定量数据。WB 步骤复杂，通常包括：蛋白样本制备→电泳→转膜→封闭→孵育一抗→孵育二抗→显影→分析。WB 任何过程出现 Bug 均可影响结果的重复性与灵敏度，因此必须注意将 W
