求教,HCP试剂盒中的捕获抗体和酶标抗体是否一样?
2021-08-09
问题描述:
看了下说明书,上面没有具体说。感觉捕获抗体和酶标抗体需要对HCP有不同的结合位点才能形成稳定的抗体-HCP-抗体复合物。不知道有没有战友熟悉,求解惑,谢谢!
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jackieustc
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原理上肯定是这样的,结合位点一致的话,就是竞争关系,不能形成三明治结构了。所以采用多抗,抗的是不同表位的,这样采用有捕获,有检测?
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FDUzhouwb
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jackieustc原理上肯定是这样的,结合位点一致的话,就是竞争关系,不能形成三明治结构了。所以采用多抗,抗的是不同表位的,这样采用有捕获,有检测?多谢版主!不知版主对自建HCP残留体系是否有研究,如果只使用自身的HCP去免疫动物获得的多抗作为捕获抗体的话,检测抗体仍使用KIT中的,这样的体系是否还是没有太大意义?
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天山飞雪1996
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答案详细真是
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jp2004150222
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好像很多文献中,所用的检测抗体就是指酶标记后的捕获抗体。可能是因为宿主蛋白抗体都是多抗,分子量较大的HCP,一般都会有多个表位可诱导产生抗体,所以一般情况下就可避免你所说的情况。不过,15版药典中的捕获抗体与检测抗体来源于两个种属(兔子与老鼠),这样或许更能避免你所担心的问题。
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1plusone
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FDUzhouwb看了下说明书,上面没有具体说。感觉捕获抗体和酶标抗体需要对HCP有不同的结合位点才能形成稳定的抗体-HCP-抗体复合物。不知道有没有战友熟悉,求解惑,谢谢!试剂盒中两个抗体应该是不同表位抗体,有可能是两个对多抗,也有可能是一个多抗一个单抗,自己免动物获得捕获抗体,用试剂盒中的酶标抗体,如果是两个配对抗体应该是可以的,但是这种可能性应该比较小,所以要筛的话需要同时筛到两个能配对的抗体,一个用作标记,一个用作捕获。
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jackieustc
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展开引用1plusoneFDUzhouwb看了下说明书,上面没有具体说。感觉捕获抗体和酶标抗体需要对HCP有不同的结合位点才能形成稳定的抗体-HCP-抗体复合物。不知道有没有战友熟悉,求解惑,谢谢!试剂盒中两个抗体应该是不同表位抗体,有可能是两个对多抗,也有可能是一个多抗一个单抗,自己免动物获得捕获抗体,用试剂盒中的酶标抗体,如果是两个配对抗体应该是可以的,但是这种可能性应该比较小,所以要筛的话需要同时筛到两个能配对的抗体,一个用作标记,一个用作捕获。......HCP检测试剂盒不可能有单抗的;HCP本身就是个多物质混合物。别的某一个单一成分的ELISA检测试剂盒倒是可以。
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1plusone
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针对HCP试剂盒具体用的是多抗还是单抗,还是需要查些资料看看别人的平台是怎么建立的了,之前园里也发过类似的帖子,楼主可以看看,信息量还是挺大的。抗体杂质检测项中的HCP残留酶联免疫检测方法专属性怎么验证?-蚂蚁淘论坛
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