*请输入10-500个字符
已帮助
0人
0人
本回答由网友推荐
用户
请教做过DNA 脂质体法转染细胞的高手DXY721认为:悬浮细胞和贴壁细胞在转染过程中差别不大,主要差别在于转染后的筛选,当然如果你做的是瞬时转染就不存在筛选的问题了。其实转染的过程很简单,问题是能不能转的进去的,转染率能有多少,转进去是否可以稳定表达目的蛋白等等。我们也是用脂质体做悬浮细胞的转染,说明书上都有具体的操作过程,将脂质体和目的基因按比例混合,然后加到细胞悬液里就OK了,说的简单,实际上还是有一些细节要注意的,比如脂质体和目的基因混合的比例,转染的细胞数,细胞的代数,细胞的状态,有的还要求在转染的前一天传代一次,不过不要怕,这些在脂质体说明书上都有明确的说明,按照说明书做就可以了。jinghuanlv认为:悬浮细胞和贴壁细胞转染还是有很大不同的。脂质体转染的原理基于电荷吸引原理,先形成脂质体-DNA复合物,散布在细胞周围,然后通过细胞的内吞作用,将目的基因导入细胞内,而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞高出很多倍,所以,脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。我们实验室转染悬浮细胞是用的电穿孔法,目前为止,悬浮细胞转染的最好方法还是电转,我们实验室用的电转仪是Bio-Rad的,使用条件是电压250V,电容975uF,效果不错,不妨一用。
▍
相关分类
▍
相关文章
免疫荧光(IF)常见问题及优化方案 | 每日生物评论
松弛肽2(RLN2)重组蛋白(多属种)_价格_上海钦诚生物科技有限公司
【求助】WB检测AMPK和PAMPK总是做不出来 经验共享 分析测试...
荧光素酶报告基因载体—— pGL2
Health Essence of Asia 亞洲健康互聯
肝细胞凋亡的研究进展
讯丰通助行仪:足下垂患者的好帮手 DXY.cn
Lonza AMAXA 4D电转仪,细胞核转染系统
Gene Pulser Xcell™ 电穿孔系统 | 生命科学研究 | BioRad
BTX ECM2001+电融合电穿孔仪 ECM2001厂家报价/价格/性能参数 ...
Gelest Inc._Chemical Cloud Database
重组大鼠神经生长因子_重组大鼠神经生长因子【价格,厂家,图片,批发...
▍
相关问答