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Biotium/PMAxx, 20 mM in H2O/40069/100-ul
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Biotium/PMAxx, 20 mM in H2O/40069/100-ul
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Biotium
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PMAxx™dyeisaDNAmodifierusedforviABIlityPCR,inventedbyscientistsatBiotium.PMAxx™isanewandimprovedversionofourpopularviabilitydyePMA(propidiummonoazide).

PMAxx™dyeisaDNAmodifierusedforviabilityPCR,inventedbyscientistsatBiotium.PMAxx™isanewandimprovedversionofourpopularviabilitydyePMA(propidiummonoazide).LikePMA,PMAxx™isaphoto-reactivedyethatbindstodsDNAwithhighaffinity.UponphotolysiswithvisIBLelight,PMAxx™dyebecomescovalentlyattachedtodsDNA.ThePMAxx™-modifieddsDNAcannotbeamplifiedbyPCR.PMAxx™dyeisdesignedtobecellmembrane-impermeable.Thus,inapopulationofliveanddeadcells,onlydeadcellsaresusceptibletoDNAmodificationduetocompromisedcellmembranes.ThisuniquefeaturemakesPMAxx™highlyusefulinselectivedetectionoflivebacteriabyqPCR.

PMAxx™wasdesignedbyBiotiumscientiststobeasuperioralternativetoPMA.WhilePMAisgenerallyeffectiveatdifferentiatingbetweenliveanddeadbacteriabyqPCR,itdoesnotcompletelyeliminatePCRproductsfromdeadcell DNA.Thiscouldpotentiallygivefalsepositiveresults.Biotium’snewdyePMAxx™ismuchmoreeffectiveateliminatingPCRamplificationofdeadcellDNA,andthereforeprovidesthebest discriminationbetweenliveanddeadbacteria.

SinceBiotiumfirstdevelopedPMAdye,therehavebeennumerouspublicationsontheuseofthedyeinpathogenicbacterialdetectionrelatedtofoodandwatersafety,medicaldiagnosisandbiodefense(downloadthePMAReferenceList).PMAxx™shouldbecompatiblewithallexistingPMAprotocols,butwithsuperioractivity.OfcoursewealsostillselltheclassicPMAdye,inwater(40019)orlyophilizedformat(40013).

ForviabilityPCRofGram-negativebacteriawehighlyrecommendusingourPMAEnhancer(31038)inconjunctionwithPMAxx™.PMAEnhancerforGramNegativeBacteriawasdesignedtoimprovePMA-mediateddiscriminationbetweenliveanddeadGram-negativebacteria.WhenasequencefromaGram-negativebacteriaisamplifiedbyPCR,samplespre-treatedwithdyeandEnhancershowadecreaseinthesignalfromdeadcells,withnochangeinthesignalfromlivecells.PMAEnhancerisparticularlyusefulforsamplesinwhichbacteriawerekilledusingmildmethodssuchaslowheat.

Biotiumalsoprovidesstrain-specificPMAReal-TimePCRBacterialViabilitykitswithvalidatedprimersfor7selectedpathogens:M.tuberculosis,S.aureus,MRSA,Salmonella,E.coli,E.coliO157:H7andListeria.Thesekitsprovideeverythingthatyouneedfortheselectivedetectionofyourfavoritespeciesoflivebacteriabyreal-timePCR.Don’tseeyourfavoritestrain?Letusknowattechsupport@biotium.com.

Real-TimePCRBacterialViabilityKits

ForphotoactivationofPMAxx™dye(orPMAorEMA),werecommendtheuseofBiotium’sPMA-Lite™LEDPhotolysisDevice(E90002),whichisdesignedtoconductphotolysisundercontrolledconditions.

  • Abs=466nm(beforephotolysis)
  • Abs/Em=~510/~610nm(followingphotolysisandcovalentattachmenttoDNA/RNA)
  • Darkredsolution
  • Storeat-20°Candprotectfromlightatalltimes

References

PMAxxReferences

Garcia-Fontana,C.,etal.(2016)ANewPhysiologicalRolefortheDNAMoleculeasaProtectoragainstDryingStressinDesiccation-TolerantMicroorganisms.Front.Microbiol.Dec22;7:2066.

Randazzo,W.,etal.(2016)EvaluationofviabilityPCRperformanceforassessingnorovirusinfectivityinfresh-cutvegetablesandirrigationwater.Int.J.FoodMicrobiol.Jul16;229:1-6.

Randazzo,W.,etal.(2017).Improvingefficiencyofviability-qPCRforselectivedetectionofinfectiousHAVinfoodandwatersamples.JApplMicrobiol.AcceptedAuthorManuscript.doi:10.1111/jam.13519

PMAReferences

Nocker,A.,Cheung,C.Y.,andKamper,A.K.(2006).Comparisonofpropidiummonoazidewithethidiummonoazidefordifferentiationoflivevs.deadbacteriabyselectiveremovalofDNAfromdeadcells.J.MicrobioMeth.67(2),310-320.

DownloadthefullPMAReferenceList.

Biotium公司是一家在荧光技术领域独树一帜的生物技术公司,公司位于美国加利福尼亚的BAYAREA------世界上首要的生物科技中心。该公司一直致力于开发和生产用于生物医学研究的荧光指示剂及其他特殊生化产品。其产品被广泛应用于细胞生物学、蛋白质组学、分子生物学、免疫学、微生物学、诊断学、生物化学、神经科学、血液流动检测及大规模药物筛选等众多领域。Biotium公司专利产品众多,包括已经被广泛使用的实时PCR定量荧光染料EvaGreen、具有划时代意义的凝胶核酸染料GelRedGelGreen,以及最新推出的CheetahTaq热启动酶个CF系列蛋白质标记染料等等。


GelReD®是一种超灵敏、极稳定和环境安全的荧光核酸染料,用于取代高毒性溴化乙锭(EB),用于在琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶中染色dsDNA、SSDN或RNA。GelRed®比EB敏感得多,无需拆解步骤。
GelReD®和EB具有几乎相同的光谱,因此您可以直接更换EB与GeldRead®,而不改变您现有的成像系统。
凝胶红可用于琼脂糖凝胶中dsDNA、ssDNA或RNA的预染色或后染色。凝胶红还可用于聚丙烯酰胺凝胶中dsDNA、ssDNA或RNA的后凝胶染色。因此,凝胶化与下游DNA操作(如限制性消化、测序和克隆)兼容。
优势

1.比EB更安全:Ames试验和其他试验显示无致突变和非细胞毒性

2.易处理:通过直接排放到下水道或常规垃圾中的环境安全试验

3.超灵敏:比EtBr和SYBR®安全型更灵敏

4.非常稳定:可在水中使用,在室温下长期储存稳定,可微波

5.使用简单:非常简单的预处理或电泳后凝胶染色程序

6.与标准紫外线透照仪兼容:无需改变光学设置即可替代EtBr

7.与下游应用兼容:凝胶纯化、限制性消化、测序和克隆



GelRed和GelGreen是设计以取代剧毒的代替高毒性的溴化乙锭(EtBr)的新一代核酸凝胶荧光染料。Biotium科学家研发的GelRed和GelGreen集低毒性、高灵敏性和出色的稳定性等优点于一体,效果由于EtBr及其他EtBr替代品。


几十年来,EtBr因极其低廉的价格,一般的灵敏度,一直被用作核酸凝胶染色的主要染料。然而EtBr是一个高度诱变的物质。该染料的使用安全隐患,净化及废物处置的相关费用等,终导致其代价高昂。正因如此,近年来市场上出现了一些替代品,如SYBR系列染料等。尽管这些替代染料减少了致突变性,但却丧失了染料其他方面的功能。例如,SYBRSafe的灵敏度很低,SYBRGreen及SYBRGold的稳定性远远低于EtBr。SYBR染料能快速的进入细胞,结合线粒体及细胞核DNA,是的染料在一定浓度是有毒的。事实上,在紫外线或其他诱变剂诱导下,SYBRGreenI强烈的突变性已经被广泛认知。(Ohta,etal.MutRes492,91(2001))

为了保证GelRed和GelGreen的安全性,Biotium的科学家采用一种新型非常简单的概念:阻止染料进入活细胞减少遗传毒性。我们相信,不给DNA结合染料渗透活细胞中结合基因组DNA的机会,便可以保证染料没有或大幅度减少其诱变性作用。因此,我们设计的GelRed和GelGreen染料拥有独特化学结构保证其无法渗透细胞膜。Ames试验验证即使浓度远远高于实验者操作凝胶染色的工作浓度,GelRed和GelGreen也无诱变性。此外,环境的安全性试验表示,GelRed和GelGreen是完全无害的,对水生生物无毒。因此,废弃的GelRed和GelGreen可以直接倒入下水道,或按照普通垃圾处理。


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ReagentsCells to be studied expressing green fluorescent protein (GFP). Note that the same cell type without GFP is needed as control.Hoechst 33342 stock solu 查看更多>
本实验是将氯化钙,DNA和磷酸缓冲液混合,形成包含DNA且极小的不溶的磷酸钙颗粒(沉淀),磷酸钙-DNA复合物粘附到细胞膜并通过胞饮进入目的细胞的细胞质,并以GFP标记分子最常作为标记物来追踪结合分子的表达水平和定位,或作为检测环境变化或蛋白相互作用的指标。内容来源:中国医科大学实验指导手册。 查看更多>
2021-08-21
大多数用于分析蛋白质的现代电泳方法,都是建立在聚丙烯酰胺为介质的区带电泳或圆盘连续电泳的基础上(Raynond and Weintraub,1959;David,1964;Orn-stein,1964)。聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamidegel..electrophoresis,PAGE) 同时利用了分子大小和电荷差别两种属性,从而达到分离目的。[澳] 理查德 J. 辛普森 (Richard J.Simpson) 主编  何大澄 主译 查看更多>
报告基因是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因,也就是说,是一个其表达产物非常容易被鉴定的基因。把它的编码序列和基因表达调节序列相融合形成嵌合基因,或与其它目的基因相融合,在调控序列控制下进行表达,从而利用它的表达产物来标定目的基因的表达调控,筛选得到转化体。 查看更多>
荧光素标记的抗体与标本中的抗原特异性结合后,形成抗原抗体复合物并带有荧光素;再用荧光显微镜检查上述标本,荧光素受光照射激发就会发出荧光,在显微镜下可以清晰地看见荧光所在的细胞,从而能检测某种抗原的存在与否,并可结合定量技术计算含量。内容来源:组织培养和分子细胞学技术。(北京出版社) 查看更多>
随机引物法:利用寡核苷酸延伸法进行纯化DNA片段的放射性标记 1. 在一个0.5ml的微量离心管中加入溶于30μl水的模板DNA(25ng)及1μl随机脱氧核苷酸引物(约125ng)。盖紧微量离心管,置于沸水浴中2min。2. 将微量离心管移至冰上放置1min,4℃下离心10s使引物与模板的混合物沉降至管底,将微量 查看更多>
进行蛋白质定位的免疫组织化学技术。来源:《精编分子生物学实验指南》第五版 查看更多>
2018-12-26
Invertebrate embryos develop at different rates depending on the temperature of incubation. Descriptive stages based on the number of cells and their arrangeme 查看更多>
To determine your glove size, use a chart like this one.Place your hand on a particular outline and line the webbing of your fingers up with the webbing of the 查看更多>
Negative staining is a rapid, qualitative method for analyzing microtubule structure at the EM level. Because negative staining involves deposition of heavy at 查看更多>
PicoGreen荧光染料法是一种灵敏的双链DNA检测方式,通过Modulus检测仪可以检测到pg级的微量DNA。这种方法主要用来测定微量的DNA残留,或对DNA样品进行精确定量。关键词:PicoGreen、DNA定量、药典、DNA残留、Modulus荧光检测仪。 查看更多>
2018-12-26
METHOD 1:Formaldehyde preservative – 2% formaldehyde solution in protein-free phosphate-buffered saline (PBS).Prepare as follows:Add 2 g paraformaldehyde powd 查看更多>
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荧光颜料有毒么? 123
713417ztUO2021-08-05
绝大部分合成染料本身都是没有特殊味道的,但你拿到的成品染料可能有味道,因在商品化过程都添加了助剂,有些助剂味道是很大的,比如木质素磺酸钠等。
做细胞免疫荧光实验,请问波长为633nm的选用那种荧光染料,从没接触到这样的实验,一切都要从头开始做,好晕呢.作实验真的郁闷.
荧光染料是一些具有特殊结构的化合物,其结构特征主要有以下三点:
(1)、分子内含有发射荧光的基团,如羰基、氮氮双键、碳氮双键等。
(2)、分子内含有助色基团。助色基团使光谱红移并增大荧光效率,如伯胺基、仲胺基、羟基、醚键、酰胺基等。
(3)、分子内含有刚性平面结构的共轭π键。分子内共轭体系愈大平面性愈强其荧光强度愈高。一些能提高共轭度的因素能提高荧光效率,并使荧光波长向长波方向移动。 就是荧光染料的附着物,主要作用有帮助荧光染料展色、提高荧光染料与下游树酯的相溶性、保护荧光染料的性能。通常载体树脂是强极性树脂,分子中含有胺基、羟基、醚键、酰胺基等强极性基团,一方面有助色作用,增大荧光效率;另一方面与荧光染料有很好的相溶性,有助于染料的均匀分散。
荧光颜料常用的载体树脂有胺基树脂、苯代三聚氰胺一甲醛树脂、聚丙烯酸酯树脂、聚酰胺树酯、聚酯树脂、聚氨酯树脂等。 (1)、热塑性荧光颜料:线型
(2)、热固性荧光颜料: 体型
(3)、可溶解色精荧光颜料
(4)、水乳型荧光颜料 (1)、胺基树酯
(2)、聚酰胺树酯
(3)、聚酯树酯
(4)、丙烯酸乳液 (1)、塑胶类
低温型
中温型
高温型
(2)、涂料类
水性涂料
油性涂料
粉末涂料 (1)、含甲醛
(2)、不含甲醛
第一批用于细胞生物学的荧光蛋白包括藻胆蛋白(phycobiliproteins)和从蓝藻(cyanobacteria)中提取的触角光合色素(photosynthetic antenna pigments)。这些生物大分子都含有多种胆汁三烯生色基团(bilin chromophores)。这些生色基团都包裹在一种基质结构中,这样就能将它们的淬灭作用降至最小,因此这些藻胆蛋白的荧光亮度要比小分子荧光染料的亮度高出两个数量级。不过这些藻胆蛋白的“个头(分子量高达200KD)”也限制了它们在细胞内的扩散,因此,它们也只能与抗体联用,在流式细胞术试验或ELISA试验中用来检测细胞表面的蛋白质分子。
碘化丙啶(propiolium iodide,PI)能嵌入DNA双螺旋中,可使荧光强度增加约20倍,以488nm波长激发,DNA/PI复合物最大的发射波长约为615nm.
1.小鼠Lewis肺癌细胞DNA含量测定方法
(1).从C57BL/6小鼠上切除肿块,在培养皿内用PBS冲洗.
(2).去除结缔组织及脂肪,剪碎肿块.
(3).小碎片移入1.20×38mm注射针,加压使其通过,于4℃条件下重悬细胞于HBSS中.
(4).将200~300μL细胞悬液(5×105细胞/mL)中加入3mL PI(50μg/mL),染色3LL细胞,于4℃存放20~30分钟.
(5).测定580~750nm之间的发射荧光,以去除末结合PI产生的激发光与发射光谱线之间的重叠部分.
那种一掰就咔嚓一下的,然后出现荧光的能戴在手上的一次性荧光棒有辐射吗?带的时间长点会对身体有害吗?希望专业人士解答,说下自己的工作好吗?
靓丽的橙色
是欢快活泼的光辉色彩,是暖色系中最温暖的色,它使人联想到金色的秋天,丰硕的果实;
是一种富足、快乐而幸福的颜色。让人感觉成一种稳重、含蓄又明快的温暖;
橙色也会带来一种甜甜的感觉。
示踪染料有很多种,跟据你的目的和实验方法来选取,比如calcein,dri,cfda,还有bcef等。
这些染料都非常成熟,光毒和淬灭都很低,当然要考虑到你采集图像时的显微镜参数。
比如calcein,常用的示踪,绿光(虽然这些颜色只是根据光谱加上去的伪彩),但要考虑你的实验过程中结合细胞结构,是否会伴随calcein的泄漏,就是荧光降低。
dri,还可以看膜啊
cfda也不错
bcef虽是ph指示,但你试验时不仅可观察细胞,还可看细胞ph变化,也行。
当然你或许还要结合其他方法,如细胞免疫化学等手段去双染或多染,都需要综合考虑染料之间特性。单独染一个染料,有点浪费,不如多染,数据和图像也好看些。现在流行细胞成像。
荧光显微镜用什么染料较好_这样 123
晓星后勤部cmCL2021-07-23
荧光显微镜是最经典的灵敏的荧光染料,它可对细胞中的DNA和RNA同时染色而显示不同颜色的荧光,DNA呈绿色荧光,RNA呈橙红色荧光。EB:染色DNA和RNA荧光素双醋酸酯(FDA):FAD 本身无荧光,无极性,可透过完整的原生质膜。 一旦进入原生质体后,由于受到酯酶分解而产生 具有荧光的极性物质荧光素。它不能自由出入原 生质膜,因此有活力的细胞能产生荧光,无活力 的原生质体不能分解FAD无荧光产生。5mgFDA溶于1ml丙酮中,避光4℃下贮存,使用 时取0.22mlFDA贮存液加入5ml0.65mol/L甘露醇中.使用时,使最终浓度为0.01%。荧光染料Ho33342和若丹明123: 活细胞双荧光染色观察细胞核和线粒体。一般的生物染料不能穿透细胞膜,只有当细胞被固定后改变了细胞膜的通透性,染料才能进入细胞内。但有些活体染料能进入活细胞,并对细胞不产生毒性作用。荧光染料Ho33342和若丹明123都是活体染料。Ho33342能与细胞中DNA进行特异的结合,若丹明123能与线粒体进行特异的结合。采用两种荧光染料的混合染液可对一个活细胞的核和线粒体同时染色。
北京安立通科技有限公司官网123
要拼才能赢2021-07-28
荧光颜料有毒么?
荧光染料选择和数据分析 123
众里寻清忧2021-07-26
最常用的就是洗衣粉中的荧光增白剂,也就是白色荧光染料,几乎所有配方的洗衣粉中都有。
然后是碱性荧光染料,造纸厂用来增加纸的亮度。
直接和分散的荧光黄,印染厂用来增加棉质和化纤面料的艳度
请问表达绿色荧光蛋白(GFP)的细胞做流式检测表面分子的表达情况能够使用Fitc标记的抗体么?