B 淋巴细胞膜表面免疫球蛋白（SmIg）的检查实验一直接免疫荧光法
| 实验方法原理 | SmIg是B细胞的抗原识别受体，也是B细胞特异的表面标志，用直接免疫荧光法可检查出SmIg。用荧光素标记的抗Ig抗体，在一定条件下与淋巴细胞混合，荧光素标记的抗Ig抗体可以与B细胞表面的Ig结合，在荧光显微镜下观察可见B细胞膜上出现荧光。此方法可用来鉴定B淋巴细胞。 | ||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 实验材料 | ICR小鼠 试剂、试剂盒 | 异硫氰酸荧光素（FITC）标记的兔抗小鼠Ig抗体Hank's液 仪器、耗材 | 台式离心机离心管吸管移液管 实验步骤 | 1. 采用颈椎脱臼法处死小鼠，解剖取出脾脏放入盛有6mlHank"s液的平皿中，用100目钢网研磨，混匀。从中吸取1ml细胞悬液放入一试管中，加满Hank"s液，离心1000rpm，10分钟，洗涤细胞一遍。倾去上清，沉积的细胞恢复1ml容积，即为约1×107/ml的细胞悬液。另取一支试管，吸取1×107/ml的细胞悬液0.4ml加Hank"s液3.6ml，即为1×106/ml的细胞悬液。 2. 取2ml离心管两只，各加入1×106/ml的细胞悬液1ml，用台式离心机离心2000rpm，3分钟，弃去上清液。一支加入荧光素标记的兔抗鼠Ig抗体100μl，另一支不加抗体作对照，置4℃冰箱30分钟。 3. 取出离心管，用Hank"s液洗涤细胞两次，以去除游离的抗体，最后一次离心后弃去上清液，留少许回流液，混匀，滴片，用荧光显微镜观察。 注意事项 | 一、在滴片前要彻底去除游离的抗体，以避免假阳性结果。  其他 | 一、实验结果 荧光显微镜观察，落射激发光下SmIg阳性细胞可见环状或斑点状荧光。用钨丝灯光源透射光照明计数同一视野内淋巴细胞总数，共计数200～300个淋巴细胞，算出其中SmIg阳性细胞的百分数。 |
免责声明 本文仅代表作者个人观点，与本网无关。其创作性以及文中陈述文字和内容未经本站证实，对本文以及其中全部或者部分内容、文字的真实性、完整性、及时性本站不做任何保证或承诺，请读者仅作参考，并请自行核实相关内容。
版权声明 未经蚂蚁淘授权不得转载、摘编或利用其他方式使用上述作品。已经经本网授权使用作品的，应该授权范围内使用，并注明“来源：蚂蚁淘”。违反上述声明者，本网将追究其相关法律责任。
发布于 ： 2021-08-01
阅读（203）
▍
相关分类
▍
相关文章
Organizations
彗星实验（Comet assay）如何做？
美人工合成抗艾新药外源凝集素_爱学术
M13噬菌体单链DNA的制备
临床化学分析技术的新进展
小鼠己糖激酶(HK)ELISA检测试剂盒(大鼠,人)_小鼠ELISA试剂盒上海...
考马斯亮蓝R250及G250染料
荧光剂的危害到底有多大?真相在这里_增白剂
一种制备单克隆抗体的杂交瘤细胞克隆用培养基及制备方法
Directory: Top/World/Chinese_Simplified/健康/药学/组织
Ernesto Alejandro Lozano Sabido Guadalajara Area, Mexico |...
一、荧光标记单参数检测造血干细胞——CD34FITC_CNKI学问
▍
相关问答
