流式细胞计量术（基于荧光的蛋白质分析）实验一活细胞表面抗原的荧光染色（直接免疫荧光）
| 实验材料 | 细胞初始抗体 试剂、试剂盒 | PBS溶液叠氮化钠 实验步骤 | 1.在培养皿中加入1mmol/LEDTA/1mmol/LEGTA的PBS溶液，轻摇，收获细胞。4℃1000g离心5分钟。 2.用4mlPBS+0.1%叠氮化钠和1%BSA或热的灭活血清洗细胞。 3.计数细胞，每个样品的最小浓度为1X106/ml。 4.将样品等分为50μl小体积的含0.1%叠氮化钠和1%热的灭活血清或1%的PBS溶液。 5.加合适滴度的初始抗体，用系列稀释确定合适滴度范围。 6.在冰上孵育细胞30分钟。 7.在含叠氮化物和BSA或热的灭活血清的4mlPBS中洗细胞。 8.1000g离心细胞5分钟。 9.在相近体积的含0.1%叠氮化物和1%BSA中重悬细胞，终浓度为1X106~5X106/ml。 |
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发布于 ： 2021-09-13
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