培养细胞的染色实验一Giemsa染色法
实验方法原理 | Giemsa染色是最常用的方法之一,它简便、快速,适用于多种细胞和染色体染色。 | ||||||
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试剂、试剂盒 | Giemse甘油甲醇Sorensen 仪器、耗材 | 滴管玻璃片 实验步骤 | 1. 染液制备 (1)称Giemse粉0.5g、甘油22ml,在研钵内先用少量甘油与Giemsa充分混合,研磨至无颗粒; (2)再将剩余甘油混在一起;56℃保温2小时后,加入33ml纯甲醇,保存于棕色瓶内。 2. 染色步骤(以盖片培养法或涂片法为例) (2)细胞标本用甲醇固定10分钟,或1:3醋酸/甲醇固定30分钟,用滴管把染色液布满玻片上(注意不要有气泡,用染色缸染色亦可); (3)染10~15分钟后,用自来水冲去玻片上多余的染料,空气干燥、二甲苯透明、光学树脂胶封固。 3. 结果 胞核染成紫红色或蓝紫色,胞浆染成粉红色。 注意事项 | 1. 染色液宜现用现配,保存时间最好不超过48小时,旧染液染色效果不好。 2. Giemsa对pH极敏感,缓冲液pH值要调准确,否则染色效果不好。 3. 用染色缸染色时,随染色时间的延长,在染液表面常形成一层氧化膜(发亮),这层氧化膜易附在片上形成污秽,且不易除掉。因此在用染色缸染色,尤其用的不是现配者时,染色前应先用小片滤纸刮除液面的氧化层再进行染色。 4. 染色完毕,应把标本浸入水中洗除染液,或用自来水直接冲掉多余染液。 |
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发布于 : 2018-08-06
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