细胞骨架观察实验一考马斯亮蓝染色法
实验方法原理 | 荧光免疫染色法显示细胞骨架具有清晰优点,但操作过程较复杂;考马斯亮蓝染色法简便易行,清晰度稍差,但如分化处理适当能提高清晰度。 | ||||||
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实验材料 | 细胞 试剂、试剂盒 | 磷酸二氢钠磷酸氢二钠戊二醛甲醇冰醋酸蒸溜水考马斯亮蓝 仪器、耗材 | 培养瓶 实验步骤 | 1. 固定液准备 0.1M磷酸二氢钠(NaH2PO4·2H2O)14.0ml 0.1M磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O)36.0ml 蒸馏水50.9ml (以上各液相混合后再加戊二醛) 25%戊二醛50.0ml 染色液: 甲醇46.5ml 冰醋酸7.0ml 蒸溜水46.5ml (以上各液相混合后再加染) 考马斯亮蓝0.2g 2. 培养细胞 用支持物盖片培养法; 3. 固定 从培养瓶中取出细胞盖片,投入固定剂中固定15分钟; 4. 漂洗 取出盖片先置蒸馏水中漂洗2分钟,再用蒸馏水洗两次,每次1分钟; 5. 染色 在考马斯亮蓝液中染色60分钟; 6. 按4程序漂洗; 8. 漂洗 按4处理; 9. 脱水→各度酒精→二甲苯; 10. 封片 用树胶封固; 11. 结果 细胞内微丝呈蓝色,如分化较好时背地清亮,反之会影响微丝的清晰度。 |
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发布于 : 2018-08-06
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