单克隆抗体上清的制备实验一备选方案1(单抗上清大量制备)
实验材料 | 抗体 试剂、试剂盒 | DMEM-10乙醇 仪器、耗材 | 离心机培养瓶转子 实验步骤 | 1. 重复基本方案1步骤1,按1:10分传到终体积100ml的完全DMEM-10/HEPES中。 2. 准备传代细胞时,应将175cm2培养瓶中的内容物(100ml)转移到—个850cm2旋转培养瓶中,另加150ml完全DMEM-10/HEPES,盖紧瓶盖,置于转瓶培养装置上于37℃培养1~2天。 3. 用饱蘸70%乙醇无菌海绵擦拭旋转培养瓶的瓶盖和瓶颈,打开瓶盖,加250ml完全DMEM-10/HEPES,盖紧瓶盖,再在转瓶装置上培养1~2天。 4. 如步骤3所述擦拭瓶盖及瓶颈。打开转瓶,加大约2L的完全DMEM-10/HEPES,加至几乎满瓶(根据转瓶容量计,总体枳大约2.5L),盖紧瓶盖,并置转瓶培养装瓶上,37℃培养直至培养液变黄色(大约5天)。 5. 将培养液倒入无菌的250ml的锥形离心管中,室温下250g离心20min,收集上清,弃沉淀,将上清分装成数管冻存。 |
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发布于 : 2021-08-15
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