ChIP Validated Antibody & Positive Primer Sets
Chromatrap® ChIP-validated Antibodies can now be supplied with the correct matching primer sets to cover all aspects of ChIP validation.
- Reduce time spent searching databases and designing forward and reverse primers
- Purchase superior quality ChIP-validated antibodies with their matching high-quality primers
- Have confidence that the primers are tested with the exact antibody and gene target
The Chromatrap® ChIP Validated Antibody Primer sets include a positive control antibody, a negative control antibody (non immune IgG) to evaluate non-specific binding and species-specific positive control qPCR primers.
公司背景:SICGEN抗体是一家葡萄牙生物技术公司,专门研发和生产用于生命科学研究的抗体。公司利用尖端技术,以最优的质量和最具竞争力的价格,致力于成为世界多克隆抗体及抗体相关产品和服务的提供商。它既是一个产品公司也是一个服务公司,它的主要业务是发现和销售用于研究和科学目的的新抗体。多年来,SICGEN一直为国内外主要大学、科研机构、制药企业和生物技术公司生产定制的多克隆抗体。
Biotechrabbit为诊断、生命科学研究与应用市场创新、开发和生产性能卓越的分子生物学产品。所有的开 发、生产与物流均在我们的柏林工厂进行。分子生物酶及蛋白的生产是Biotechrabbit的支柱业务。我们采用高密度原核与真核发酵,之后以数道经过精确调整的纯化步骤生产高纯度蛋白,可进行小样和大规模生产。研发部门由经验丰富的科学家及业务开发人员组成,重点关注客户及合作伙伴的需求。我们的团队专心致力于提供用于分子生物学领域的顶级品质产品。
对单一和多重靶标均具有同类最佳性能
在病原体检测方面具有高度特异性的便捷预混液
对低丰度DNA靶标高度灵敏
BiotechrabbitCAPITALqPCR ProbeMix预混液用于对基因组、CDNA和病毒序列进行定量分析,在单一和多重qPCR方面都具备卓越的性能。该预混液的高灵敏性非常适合于诸如病原体检测等应用中检测低丰度DNA靶标。
涵盖宽广线性范围的准确定量。通过在非模板质控品中进行qPCR测定评价灵敏性、特异性及是否无非特异性扩增。使用CAPITALqPCRProbeMix预混液和他品牌供应商(T)的预混液对人类基因组DNA进行稀释(从200ng至0.02ng)和扩增。
ebiomall.com
>
>
>
>
>
>
>
>
>
>
>
>
1取组织
(1) 灌注固定:暴露心脏,将注射针头插入左心室,剪开右心耳,快速灌注PBS,待右心耳处流出澄清液体,换4%多聚甲醛灌注到大鼠四肢强直为止,快速取脑和肾。
(2) 固定:将组织置于4%多聚甲醛中固定15小时
(3) 脱水:将组织放入30% 蔗糖溶液中直至下沉
(4) 切片:脑组织冰冻切片20微米,37度烘干2h以上;
(5)将切片放置-80度保存,随用随取。
2免疫单标记
(1)做抗原修复(0.4g柠檬酸、3g柠檬酸钠、1000ml水配制成溶液,放到水浴箱中90~94℃保存15min),冷却后, 用1*PBS反复洗标本10min,吸去PBS,同时向标本加渗透液(配0.4%trition液,然后将BSA加入到配好的trition液中,配成1%浓度)100ul,常温下湿盒反应1h。
(2) 吸去渗透液,同时向标本加block液(5%封闭用正常山羊血清)100ul,常温下湿盒反应5h。
(3) 吸去block液,同时向标本加入1:50稀释的羊抗鼠一抗100ul,37度湿盒反应过夜。
(4)吸去一抗,并回收,用1*PBS洗液反复洗15min。
(5)快速从冰箱中取出驴抗羊的二抗,并立即用锡纸包裹,注入到一个新的以锡纸包裹的tube管中并用PBS以1:200稀释。
(6)进入暗室,吸去PBS,同时加入二抗100ul,37度湿盒反应2h,封片。
(7)放置到荧光显微镜下观察。
没有marker,怎么知道你做的蛋白大小?
没有参照物,怎么知道你跑的快不快?
没有尺子,怎么知道你的size大小?
凭嘴说吗?
单克隆抗体结构相似且均一,有高度特异性
多抗,稀释度更大,特异性相对较差,容易出现多条带。
兔的单克隆抗体和鼠的单克隆抗体在使用上不会有什么区别。
用来很多抗体,许多时候觉得单抗多抗也未必是理论上那样的。单抗做不好的也有,多抗条带唯一且清晰的也有。
而且很多蛋白的抗体未必有那么多的选择。
羊多抗免疫步骤和兔多抗免疫步骤一样的,周期也是一样的,就是免疫的部位不同,羊的免疫部位是:羊的小腿内侧皮下。采血部位是:颈静脉;放血部位是:颈静脉;最后收集血的部位:颈动脉。希望对你有帮助。
一般来说多克隆的阳性率高一些,但出现假阳性的比例也高一些。
1、制备抗原。
2、选择实验动物。
3、动物免疫。
4、试取血进行测试,看看是否成功免疫。
5、如果成功免疫,杀死实验动物,采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。包括纯度以及特异性。
二、抗体分类
抗原通常是由多个抗原决定簇组成的,由一种抗原决定簇刺激机体,由一个B淋巴细胞接受该抗原所产生的抗体称之为单克隆抗体(Monoclone antibody)。由多种抗原决定簇刺激机体,相应地就产生各种各样的单克隆抗体,这些单克隆抗体混杂在一起就是多克隆抗体,机体内所产生的抗体就是多克隆抗体;除了抗原决定簇的多样性以外,同样一类抗原决定簇,也可刺激机体产生IgG、IgM、IgA、IgE和IgD等五类抗体。多克隆抗体是由异源抗原(大分子抗原、半抗原偶联物)刺激机体产生免疫反应,有机体浆细胞分泌的一组免疫球蛋白。多克隆抗体由于其可识别多个抗原表位、可引起沉淀反应,制备时间短,成本低的原因广泛应用于研究和诊断方面。
三、免疫方法
可以采用以下各种方法之一进行免疫。
(1)淋巴结注射法:①在兔的两后足跖部皮下(或皮内)注射活卡介苗 50mg(每侧约0.30ml) 。7~10 天后,兔跖及腘肌淋巴结肿大;②于肿大的两侧淋巴结内各注射加有完全佐剂的IgG 乳化抗原 0.50ml(含 IgG 5mg/ml、青霉素 1 000U/ml、链霉素 1 000μg/ml);③必要时,14 天后,重复步骤②一次;④再过 7 天后,于两侧淋巴结内各注射加有完全佐剂的 IgG 乳化抗原0.50ml(含IgG5mg/ml、青霉素 1 000U/ml、链霉素 1 000μg/ml) ;⑤5~7天后,耳静脉采血。测定血清效价。
(2)皮下多点注射法:①家兔两侧掌(跖内各注射含有完全佐剂抗原 0.10ml(IgG 含量5mg/ml) ;②7~10 天后,脊柱两侧多点(颈、胸、腰椎各两点、共 6 点)皮下注射含不完全佐剂5的抗原,每点 0.50ml;③7~10 天后,脊柱两侧重复注射一次;④7~10 天后试血。不合格者重复步骤③。
(3)多途径联合注射法:①两侧掌(跖)内侧皮下注射含完全佐剂抗原 0.50ml(IgG 量为 5mg/ml) ;②14 天后,多点皮下注射含有不完全佐剂抗原;③7 天后,耳静脉注射不含佐剂的抗原 2ml;④测定血清抗体效价,不合格者重复步骤③,并适当递增 IgG 量。
暂无品牌问答