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怎样用重组表达蛋白制作多抗
2021-08-13
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武汉博欧特生物
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可以跑SDS-PAGE电泳,不插梳子,每次一块板子点样200ul,跑完了切胶,攒几次之后,用灭菌的研钵研磨,边磨边加PBS,注意不要加多了,一定要研磨得很细,研磨之后用1ml的注射器过一边,不堵塞说明就可以打兔子了。每次打兔子的胶不超过1.5ml,首次蛋白的量要高一些,400-500ug,以后两次减半,一般三次就可以了。我们实验室有人做过。或者可以过柱纯化,过柱纯化要加一半的佐剂,所以纯化后浓度要高于500ug/ml为宜,否则要增加免疫的次数。
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