*请输入10-500个字符
已帮助
0人
0人
sun__chao__999
用户
脂质体的转染毒性是最大的,很明显,那么多的细胞死亡是由于转染的细胞毒性导致的。对于这一点我有两个建议,一个是减少DNA的用量,我一般做转染,对于任何细胞,只要是12孔板,一般都是用1ugDNA,这个量绝对够了。,因为质粒转染进入细胞的本质,和病毒感染没区别,质粒的各种元件会从宿主细胞内抢夺细胞机器大量开始转录翻译你的目的蛋白,在这个过程中会产生大量的没有正确折叠蛋白,这些异常折叠蛋白进一步引起ER stress导致细胞凋亡。因此你用DNA太多,本身就有细胞毒性。另外就是脂质体本身的毒性。事实上,对于293系的细胞系,最好用的是PEI这种东西。毒性小,转染效率高,一般对293系列的细胞系可以轻易达到80%。polyscience有粉末买,买回来后直接在分子纯度的水里配置成1ug/uL的溶液,和你的质粒按照1ug DNA/6ug PEI对293进行转染。而且直接使用自制的PEI非常便宜,在293上远比商品化的脂质体要好。另外,如果你们实验室确实钱多,不怕花钱,建议你取用Promega的FugenHD,那个转染效率比脂质体更好,而且毒性小,至于价格。。。。。。。。。。。也更高。。。。。。。。。另外,你说漂浮的细胞有表到GFP,那个不一定是真的GFP,很多时候
已帮助
0人
0人
阿鲁巴星人
用户
转dna吗?293t怎么转都好转的。。。随便哪个都行。。。
▍
相关分类
▍
相关文章
谁收藏这个实验:秦艽对蛋清致大白鼠足肿胀的影响 实验方法 丁 ...
STOCKMEIER Gruppe | 领英
常用缓冲液配制2 常用试剂 资讯
求问引物设计的是否合格,以及引物设计的一些疑问? PCR技术讨论...
Domain Names Registered on 20090501(1)
淄博瀚博化工有限责任公司 简介_电话_地址_产品报价chemicalbook
“辅酶Q10”这种神奇的东西,你怎么可以不知道!
(共享)免疫检测的自动化 实验方法
【转染试剂盒Thermo】蛋白质转染试剂 24次价格_Thermo转 ...
关于“药物血浆浓度半衰期(t(1/2))测定”实验指导书的修改意见
MITSUI OUTLET PARK
电动采血椅 手动透析椅 透析床 医用透析床