罗氏TUNELPOD试剂盒肾组织染色
2021-08-04
问题描述:
最近开始做TUNEL染色,第一次按罗氏protocol做的,阴性对照是没有显色的。没做阳性对照。第二次、第三次做出来背景都很深,肾小管每个细胞核上都染上了棕黄色,DAB染色很快,几秒就变一片黄。具体步骤是:1烤片脱蜡至水2.蛋白酶K20ug/ML37℃10分钟3.tunel液冰上配置后加组织上,37度1h。4.pod液37℃30min5.DAB显色。在蚂蚁淘中检索后,优化了实验条件,在蛋白酶K前加了3%H2O2封闭10min,缩短了tunel液至40min。这是第三次的结果大家帮我看看
这是对照组
这是模型组
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Justin001
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单看阳性还是不错的,觉得背景重的话可以缩短下蛋白酶K的消化时间。一般新鲜组织消化时间短点,5-8分钟就可以了,而且还是室温。时间比较久的组织就适当延长下时间
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vivicwei
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Justin001单看阳性还是不错的,觉得背景重的话可以缩短下蛋白酶K的消化时间。一般新鲜组织消化时间短点,5-8分钟就可以了,而且还是室温。时间比较久的组织就适当延长下时间我的是石蜡切片3um的。一般需要消化多久呢
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Justin001
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我一般消化6分钟
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vivicwei
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Justin001我一般消化6分钟好的,我今天试试再摸下条件。室温6分钟
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