1、由于荧光引物价格较高,建议首先合成普通引物进行预实验,确定引物可用后再合成荧光引物。
2、荧光标记可能会对引物的理化性质有影响,但一般来说影响不大。如果使用原有条件扩增效果不理想,请在原有条件的基础上优化扩增条件。
3、请按如下信息溶解引物:短暂离心,收集DNA制品于管底,然后慢慢打开管盖,加适量溶解液配制成母液。盖上管盖,充分振荡或用手指弹管底,使DNA充分溶解。
4、注意!一般不要使用蒸馏水溶解,因为有些蒸馏水的pH值比较低(pH4-5),酸性环境容易使荧光素脱落甚至导致引物降解,可以使用10mMTris(pH7.5-8.0)缓冲液或TE(pH7.5-8.0)先配置成母液,使用时建议用无菌水配置成工作液。
5、注意!荧光标记引物需要避光保存(棕色管)。
6、注意!荧光标记引物容易吸附在管壁,使用前振荡混匀。
7、所有引物避免反复冻融。建议将母液分装成若干小管,使用时先取一小管进行稀释。长期保存冻存在-20度,或者更低温度;短期保存,放在4度。
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