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zanquana
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给你提供一个马血清制备过程,专利CN200510026317.3 1、一种马抗血清的制备纯化工艺,该工艺包括下述步骤: (1)消化步骤:用免疫血浆消化工艺将免疫血浆消化; (2)第一次沉淀过滤处理步骤:将上述处理的消化液中加入硫酸铵形成混悬液,并调节pH值为4.8-5.2,然后将混悬液加温并保持,再降温,过滤收集上清液,废弃沉淀; (3)第二次沉淀过滤处理步骤:将上述(2)步的上述清液pH值调整为7.0-7.4,加入硫酸铵进行第二次沉淀,静置后过滤取沉淀物,弃上清液; (4)明矾沉淀:即将上述(3)步的沉淀物稀释至蛋白含量不超过2g/L,再调整稀释液pH值为7.7-7.9,加明矾进行沉淀,静置后过滤取上清液,沉淀物废弃; (5)将上述上清液用硫酸铵沉淀法或超滤法浓缩制得抗血清原液; (6)离子交换剂吸附纯化: 1)用阴离子交换剂装柱,用pH值为7.0±0.2,0.15MNaCl,10mM磷酸盐缓冲液进行平衡; 2)将用0.45μm的膜进行澄清过滤的抗血清原液通过上样泵加入柱体上部,用 pH值为7.0±0.2,0.15MNaCl,10mM磷酸盐缓冲液洗柱,流速为3ml/min,收集穿透液,酸性杂质被吸附在层析介质上,F(ab)2流穿; 3)用2MNaCl清洗柱体后,用20%乙醇洗柱,使介质浸泡其中保存; 4)将穿透液超滤浓缩调整抗血清浓度,调整蛋白含量不超过170g/L,按调整后制品总量,加氯化钠使最终含量为750-950g/L,加三氯甲烷使最终含量不超过5g/L 或硫柳汞0.1g/L或间甲酚2.5g/L为防腐剂,调节pH至6.0-7.0,用0.22um滤膜除菌过滤。展开
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