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champlee
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一般都是用CsCl梯度离心吧,但是转数要高哦其实很多时候用不着纯化,多次转染扩增之后低毒就上去了我们实验室都没纯化主要经费太少
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davie2001878
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我们这边刚好实验室装修,超速离心机停用了。同时我的实验后期的做动物实验,所以病毒需要纯化。
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davie2001878
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细看了这个盒子的说明书,细节方面说的很好,也要求操作的时候的非常小心才行。
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erguo918
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试剂盒纯化得到的病毒往往有活性的病毒比率低,因为任何试剂盒都没办法区分死病毒和活病毒的,而CsCl密度梯度离心可以通过死病毒(主要是不含基因组的空壳病毒)和活病毒的密度不同来分开死病毒和活病毒。通常VP可以代表病毒总数,PFU可以代表有感染能力的活病毒。一般试剂盒纯化的VP:PFU在100:1左右。CsCl纯化后VP:PFU在30:1左右,好的情况下可以得到20:1,当然任何纯化方法都不能完全去掉死病毒(空壳病毒),虽然最终得到的病毒死病毒比率那么高,但腺病毒本身的高感染效率使得腺病毒作为一个基因转移的金标准。普通的转染试剂以及AAV,慢病毒都远远达不到腺病毒的感染效率(慢病毒的包膜不稳定,反复冻溶两三次后几乎就丧失了感染能力)。
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innogent
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验证纯化病毒的活性,区分死病毒和活病毒可以用“感染性病毒郊价测定试剂盒”进行。国内有相关试剂盒,0755-26031015
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zxg830728
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德国的塞多利斯的腺病毒纯化试剂盒纯化很好用的,就是有点贵.但是节约时间,
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xiuxiu23001
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请问你要纯化的病毒是3型还是5型的?我做的是3型的,不知道能不能用这个牌子的试剂盒?求高手回复,谢谢
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davie2001878
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我纯化的病毒是是5型的腺病毒,效果还行!
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