【求助】用QuikChange试剂盒做单点突变,测序后没有突变
2021-08-03
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laforet
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GC含量高,体系里加4%-8%的DMSO延伸时间尽可能缩短,最多16-20个循环。PCR后DpnI消化一小时后震荡混匀,离心后再消化一小时如果实在有困难,连T载体应该会容易很多
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三个土
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laforetGC含量高,体系里加4%-8%的DMSO延伸时间尽可能缩短,最多16-20个循环。PCR后DpnI消化一小时后震荡混匀,离心后再消化一小时如果实在有困难,连T载体应该会容易很多好的,谢谢前辈啦,我先试试看加DMSO,再把片段切到t载体上试试~~
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yunlongma
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请问,实验结果怎么样了???我也在用这种方法,测序显示都没有突变,求指教??
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三个土
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yunlongma请问,实验结果怎么样了???我也在用这种方法,测序显示都没有突变,求指教??我用了小一些的质粒就做出来了····如果还是做不出来那就修改一下反应时间温度循环的条件。这个试剂盒比较贵,所以在摸条件的时候不用按照说明书上的体积,只要比例对就行!
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