在细胞培养实验技术区会经常看到战友们问起MTT实验中的一些麻烦问题,由于这是一种经典的检测细胞活性实验方法,所以经久而不衰,园子里有很多做MTT的高手哦:)
这里我想像大家介绍一种新的高效细胞活性和细胞增殖测定剂——alamarBlue。介绍之前先说最重要的一点,使用alamarBlue价格比较昂贵,如果你的银子不多,呵呵,还是乖乖告诉老板你的MTT结果吧。
细胞增殖检测主要有三种方法:第一、增殖期抗体的测定(例如Ki-67和CydlinE)。第二、增殖期DNA合成标记(3H,BrdU等)。相信这两种方法少有人做,反正以前我都没听过(见笑了)。还有第三就是增殖细胞对外界环境物质的降解测定(包括大家常做的MTT和XTT、MTS,还有今天要介绍的AlamarBlue)。
AlamarBlue是一种新型的细胞活性和细胞增殖的指示剂,是一种可溶、稳定、无毒的靛蓝染料,同时适用于贴壁和悬浮细胞。它对细胞抗原的表达和杂交瘤细胞的抗体分泌功能无影响,而且非常有意义的一点就是,经过AlamarBlue测定的细胞可以继续培养或进行其他的功能测定。AlamarBlue可以用普通分光光度计、荧光光度计和酶标仪进行测定,非常方便,其测定结果同样有线性趋势,而且线性范围更广,更灵敏和稳定。
主要应用于:
a.优化细胞培养条件
b.对细胞生长因子或细胞因子进行活性定量
c.有助于开发抗生素或抗肿瘤的新药
d.了解毒性物质或污染物对细胞生长的影响
e.评估细胞介导的细胞毒作用
f.定量检测凋亡发生
g.适用于真核细胞、真菌和细菌的活性和增殖测定。
附件是AlamarBlue的产品详细说明,实验操作手册。感兴趣的战友可以看一看。还有一篇文章是比较MTT和AlamarBlue的,不过很遗憾,我没能查到全文,如果哪位高手能查出来,真心希望能够贴出来与大家分享。
Hamid,R.,Rotshteyn,Y.,RabADI,L.etal.ComparisonofalamarblueandMTTassaysforhighthrough-putscreening.ToxicologyinVitro.200418(5);703-710.
alamarbluebooklet.pdf(153.16k)
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