大家帮我看看我跑的SDSPAGE,帮我找一下原因。
2021-07-25
问题描述:
每孔加样量是:32ul蛋白+8ul上样buffer(5乘)
1-5号蛋白浓度分别是(ug/ul):0.71.12.11.64.8
1-3号为一种细胞,4和5号为LO2细胞
1-4号采用同一种方法提取蛋白,5号采用的是另一种方法
问题:4号比5号的蛋白浓度高很多,但是条带还没没5号的明显??
4号和5号为什么会有拖尾尤其是4号,而1-3号则是条带太少(只有3条)
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化石
用户
1-3号蛋白质提取方法或过程有问题。4号是1.6ug/ul,5号是4.8ug/ul,应该是5号浓度高才对呀?不过,如果您搞错了,4号浓度高于5号,由于提取方法不同,有必要考虑定量时不同提取缓冲液的影响(导致定量不准)。
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wenyangan
用户
漩涡震荡会不会打断蛋白质的肽链
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drhl
用户
4号和5号为什么会有拖尾————你在上样前是否离心了??如果离心了,你在上样时吸取的是否只是上清?你的蛋白的脱尾现象,应该是你把蛋白沉淀也加倒孔里了,原因可能就是上面的两个问题。
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