MousePrimaryDiabetic OvarianEpithelialCells
CatalogNo. MD-6036
SuggestedMedium:EpithelialCellMedium/wKit–500ml
CatalogNo. M6621
ProductDescription
MousePrimaryDiabeticOvarianEpithelialCellsfrom CellBIOLOGics areisolatedfromtheovaryofDiabetic(db/db)mice.MousePrimaryDiabeticOvarianEpithelialCellsaregrowninT25tissuecultureflaskspre-coatedwithgelatin-basedcoatingsolutionfor2minandincubatedin CellBiologics’ CultureCompleteGrowthMediumgenerallyfor3-7days.Culturesarethenexpanded.Priortoshipping,cellsatpassage3aredetachedfromflasksandimmediatelycryo-preservedinvials.Eachvialcontainsatleast0.5x106 cellsperml.Themethodweusetoisolateprimaryepithelialcellswasdevelopedbasedonacombinationofestablishedandourproprietarymethods.CellsareincubatedwithEpCAM-1(CD326)antibody,followingtheapplicationofmagneticbeadspre-coatedwithsecondaryantibody.
ProductTesting
MousePrimaryDiabeticOvarianEpithelialCellsarecharacterizedbyimmunofluorescentstainingwithantibodiesofE-cadherin(Catalog610182,BD),ZO-1(Catalog617300,LifeTechnology).Cellsarenegativeforbacteria,yeast,fungi,andmycoplasma.Cellscanbeexpandedfor3-7passagesatasplitratioof1:2underthecellcultureconditionsspecifiedbyCellBiologics.Repeatedfreezingandthawingofcellsisnotrecommended.
LaboratoryApplications
MousePrimaryDiabeticOvarianEpithelialCellscanbeusedfortheassayofcell-cellinteraction,adhesion,PCR,Westernblot,immunoprecipitation,immunofluorescentflowcytometry,orgeneratingcellderivativesfordesiredresearchapplications.
Storageof CellBiologics’ Products
CellBiologics shipsfrozencellsondryice.Onreceipt,immediatelytransferfrozencellstoliquidnitrogen(-180°C)untilreadyforexperimentaluse.Livecellshipmentisalsoavailableonrequest.Primarycellsshouldneverbekeptat-20°C.
AuthorizedUsesof CellBiologics’ Products
MousePrimaryDiabeticOvarianEpithelialCellsfrom CellBiologics aredistributedforinternallaboratoryresearchpurposesonly.Ourproductsarenotauthorizedforhumanuse,notforinvitrodiagnosticproceduresorfortherapeuticprocedures.Transferorresaleofany CellBiologics’ cellsorproductsfromthepurchasertoothermarkets,organizationsorindividualsisprohibitedby CellBiologics withoutthecompany’swrittenconsent. CellBiologics’ TermsandConditionsmustbeacceptedbeforesubmittinganorder.
Disclaimer
Appropriatesafetyproceduresshouldalwaysbeusedwiththismaterial.Investigatorsshouldhandlethecellsthattheyreceivefrom CellBiologics withcautionandtreatallprimarycellsaspotentialpathogens,sincenotestprocedurecancompletelyguaranteetheabsenceofinfectiousagents.TheentiretextofdiscussingBiosafetyinMicrobiologicalandBiomedicalLaboratories,5thed.isavailableonlineat http://www.cdc.gov/biosafety/publications/bmbl5/index.htm.
WarrantyandLiABIlity
CellBiologics’ guaranteeappliesonlytoyourpurchaseof CellBiologics’ Cellswith CellBiologics’ MediaandCoatingSolutionforappropriatecellcultureandcelltestingfollowing CellBiologics’ onlineprotocolswithin35daysfromthedateofproductdelivery.
Cell BIOLOGics公司提供高质量的基因改造小鼠及正常小鼠原代内皮细胞，小鼠干细胞，小鼠原代上皮细胞，小鼠骨髓细胞，小鼠胚胎细胞，小鼠白细胞和其它小鼠细胞。为科研者的研究提供高质量的原代细胞，并针对实验中的问题提供更多有效的和低成本的方法。 Cell Biologics细胞生物制剂公司总部位于美国芝加哥，是全球独家提供Jackson Lab基因敲除小鼠原代细胞的专业公司，产品已获美国农业部SPF认证，并经中国进出口商品检验检疫局检验准许进口。 自成立以来，Cell Biologics已开发出13个品系1,000多种可直接使用的Jackson Lab基因敲除小鼠、正常野生型小鼠、大鼠原代细胞，必将填补细胞生物学 界研究的空白。另外，Cell Biologics拥有AAALAC认证的动物实验室，提供Jackson Lab与国外其他著名实验室所有允许商用的基因敲除小鼠原代细胞分离服务。
CellBiologics是原代培养细胞和细胞培养产品的主要制造商。我们提供各种高质量的人和动物原代细胞，包括内皮细胞，上皮细胞，肿瘤细胞和干细胞，以及优化的细胞培养基和其他相关产品。小鼠原代内皮细胞最初是由CellBiologics提供的，可以根据特定的科学需求进行定制订购。您可以指望我们的高质量定制细胞分离服务！该公司还在开发针对炎性疾病的治疗平台和具有治疗活性的生物制剂的新型输送系统。我们的产品和服务 原代细胞疾病模型细胞培养基和试剂先进技术服务腺相关病毒（AAV）生产服务内皮特异性腺病毒过表达系统通用服务AAV产品-EC，神经，免疫，癌症相关基因新产品和定制服务下一代测序库生成服务ATAC-Seq库生成服务ChIP-seq库RNA-seq文库所有新产品刊物 Tie2-Notch1信号轴调节内皮骨髓小生境的再生。血液学。2019三月28。抑制MicroRNA-155支持氧-葡萄糖剥夺后的内皮细胞紧密连接完整性。JAmHeartAssoc。2018年6月26日;7（13）。主要和永生化的巨噬细胞对鼠诺如病毒感染的比较转录组学反应。JImmunol。2018年6月15日;200（12）：4157-4169。Ena/VASP蛋白通过促进跨内皮迁移过程中的尿布分离来调节活化的T细胞运输。ProcNatlAcadSci美国A.2017年4月4日;114（14）：E2901-E2910。Mas1受体介导的血管内皮信号传导机制。动脉血栓栓塞血管生物学。2017年3月;37（3）：433-445。
Cellbiologics有数百种不同的可直接用于体外试验的动物源和人源的原代细胞。包括：小鼠、大鼠、兔、猪和食蟹猴等动物源及人源各类原代内皮细胞、上皮细胞、成纤维细胞、平滑肌细胞、肿瘤细胞、干细胞、骨髓间充质干细胞、白细胞以及巨噬细胞等。还提供高质量的人、动物原代细胞完全配套培养基产品。热销产品货号规格CompleteEndothelialCellMedium/wKit(withVEGF)M1168500mlEndothelialCellGrowthSupplement-ECGS(500X)(仅限港澳地区销售)11661MLEndothelialCellMedium-SerumFree/wKitM1266SF500mlGelatin-BasedCoatingSolution-readytouse6950100MLCompleteEndothelialCellMedium/wKitM1266500mlCompleteEpithelialCellMedium/wKitM6621500mlC57BL/6MousePrimaryLungMicrovascularEndothelialCellsC57-6011FrozenVial(1x106Cells)C57BL/6MousePrimaryKidneyGlomerularEndothelialCellsC57-6014GFrozenVial(1x106Cells)CompleteCellCultureMedium/wKitM5567500mlCD1mouseprimarylivercellsCD-1018FrozenVial(1-2x106Cells)C57BL/6MousePrimaryCoronaryArteryEndothelialCellsC57-6093FrozenVial(1x106Cells)EndothelialCellMedium-SerumFree/wKitM1168SF500mlEndothelialCellBasalMediumM1168b500mlC57BL/6MousePrimaryRetinalMicrovascularEndothelialCellsC57-6065FrozenVial(1x106Cells)
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是否可以理解为纯化水得PH范围为6.3-7.6？能否直接用pH计测量？谢谢!
常用流动相加酸碱后PH的总结，希望大家能够提供一点自己测过的结果，谢谢先
两个CEX方法A和B测定同一单抗，结果碱性峰比例差不多，酸性峰比例相差约7%，相应主峰也差了7%左右。
具体来说，A方法酸性峰高，主峰低，碱性峰稍微低点；B方法酸性峰低，主峰高，碱性峰稍微高点；另外也做了CIEF，结果呢和A方法更接近。
仔细比较起来，AB两个方法的峰性和数量差不多，就不知道为什么会有这么大的差异。两个方法一个用的WCX柱-磷酸缓冲液，一个用SCX柱-MES缓冲液
大家帮我分析下：
1.两个方法哪个方法更准确，是以酸性峰高的为准还是什么？为什么？
2.这显著差异是由方法造成，具体原因是什么？柱子？
3.CIEF的结果和A方法更接近，是不是可以由此证明A方法更好或者CIEF的方法更好（因为CIEF更快更方便）？
欢迎讨论~
纠正下，A方法用的是Tosoh的柱子，B方法用的是SCX柱。TOSOH的柱子是7um的填料，10cm长。SCX是10um的填料。我本人TOSOH的阳离子柱子用的很少，这次信手用用，结果发现差异很大
那我现在就考虑，在以后方法开发过程中，除了通过流动相pH和组成、梯度、柱子选择来获得样品主峰和酸碱性的最大分离，还要关注各峰比例。因为之前比较方法好坏都只看分离度，尤其是主峰和邻近峰的分离度，获得最大分离度，自然可以做到主峰尽可能纯，但从未认真比较过各峰比例。这是一个大疏忽吧！
另外，CIEF和CEX方法原理还是有点差异的，所以分的是不同的异质体，原液放行两个方法肯定是都要做的。问题就是在早期细胞株筛选和工艺开发阶段，哪个方法才是又快又准。CIEF（iCE280)一般15分钟一个样，比CEX快多了。如果CIEF测得主峰要低于CEX结果，是不是真的完全可以取代CEX呢？CEX分离出的峰远比CIEF的多！
欢迎大家继续讨论~
因为是考察不同PH对药物的影响，样品又不好改变其PH值，这种情况怎么办？希望有经验的高手指教。
我的流动相是甲醇-水（90：10）
谢谢赐教！
请进子版按格式发贴，自行修改，谢谢。
这就是说不用酸碱预处理吗？
Whatman的网站上没有DE52最大耐受压力，请问又经验的战友应该是多少？
Whatman的网站上：
DE32DryMicrogranularDEAECellulose
SimilarperformancecharacteristicsafterprecyclingasDE52.
DE52PreswollenMicrogranularDEAECellulose
ProbablythemostwidelyusedDEAEcelluloseintheworld;usedforbiopolymerswithlowtohighnegativecharges;exhibitsexcellentresolutionwithgoodflowrates.
附件是一本图书(MethodsinMolecularMedicine,)的章节,上面说:
WhatmanDEAE52comesalreadypreswollenandonlyneedstobetransferred
totherunningbuffer50mMTE8.
lAntibodiesUsingIonExchangeChromatography.pdf(87.06k)
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