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BioAssay Systems/EnzyChrom™ Adipolysis Assay Kit/200 tests/EAPL-200
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BioAssay Systems/EnzyChrom™ Adipolysis Assay Kit/200 tests/EAPL-200
品牌 / 
BioAssay Systems
货号 / 
EAPL-200
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EnzyChrom™ Adipolysis Assay Kit

EnzyChrom™ Adipolysis Assay Kit Catalog No: EAPL-200
Price: $339 Qty:
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Adipolysis Assay Kit
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  • Assay Service
ProtocolSDS

Application

  • For quantitative assay of adipolysis and evaluation of drug effects on adipolysis.

Key Features

  • Sensitive and accurate. Use as little as 10 μL samples. Linear detection range in 96-well plate: 0.92 to 100 μg/mL (10 to 1000 μM) glycerol for colorimetric assays and 0.2 to 5 μg/mL for fluorimetric assays.
  • Rapid and convenient.The procedure involves addition of a single working reagent and incubation for 20 min at room temperature.
  • Robust and amenable to HTS assays. Potential interference by testing drugs is greatly reduced at 570nm. Compatible with culture media containing phenol red. Assays can be performed in 96 or 384-well plates.

Method

  • OD570nm, or FL530/585nm

Samples

  • Cell culture media

Species

  • All

Size

  • 200 tests

Detection Limit

  • 0.92 μg/mL

Shelf Life

  • 12 months

More Details

  • Obesityis a chronic condition that develops from storage of excessive energy in the form of adipose tissue. The resulting adiposity presents a high risk factor for diseases such as type 2 diabetes, cardiovascular diseases, and cancer. ADIPOLYSIS or lipolysis is a highly regulated process in fat metabolism, in which triglycerides are broken down into glycerol and free fatty acids. Rapid, robust and accurate procedures for adipolysis quantification in cell culture are very useful in research and drug discovery. BioAssay Systems adipolysis assay kit directly measures glycerol released during adipolysis. This homogeneous assay uses a single Working Reagent that combines glycerol kinase, glycerol phosphate oxidase and color reactions in one step. The color intensity of the reaction product at 570nm is directly proportional to glycerol concentration in the sample.

I collected the medium from the culture wells. Do I need to now centifuge the medium and collect the supernatant or do I use the medium itself for the assay?

You can assay the cell culture medium directly. However, if it contains cellular debris you should first centrifuge it and then use the clear supernatant in the assay.

What is the principle of the assay?

In the process of adipolysis triglycerides are hydrolyzed by the cellular lipases into glycerol and free fatty acids. The assay measures glycerol, the end product of adipolysis, in a coupled three step enzyme reaction: 1) Glycerol kinase converts glycerol and ATP to glycerol phosphate and ADP.2) Glycerol phosphate oxidase converts glycerol phosphate and O2 to glycerone phosphate and H2O23) HRP converts ADHP and H2O2 to resorufin and water.For more detailed product information and questions, please feel free to Contact Us. Or for more general information regarding our assays, please refer to our General Questions.
Huttala, Outi, et al (2019). Presence of vasculature results in faster insulin response in adipocytes in vascularized adipose tissue model. ALTEX-Alternatives to animal experimentation. Assay: Adipolysis in human adipose tissue. Jocken, Johan WE, et al (2018). Short-chain fatty acids differentially affect intracellular lipolysis in a human white adipocyte model. Frontiers in endocrinology 8: 372. Assay: Adipolysis in human stem cell. Wang, Rebecca Y., et al (2017). Development of a three-dimensional adipose tissue model for studying embryonic exposures to obesogenic chemicals. Annals of biomedical engineering 45.7: 1807-1818. Assay: Adipolysis in human tissues. Zheng, Qiantao, et al (2017). Reconstitution of UCP1 using CRISPR/Cas9 in the white adipose tissue of pigs decreases fat deposition and improves thermogenic capacity. Proceedings of the National Academy of Sciences 114.45: E9474-E9482. Assay: Adipolysis in pig tissues. Huttala, Outi, et al (2016). Differentiation of human adipose stromal cells in vitro into insulin-sensitive adipocytes. Cell and tissue research 366.1: 63-74. Assay: Adipolysis in human cells. Kim, Hyo Joon, et al (2016). An apolipoprotein B100 mimotope prevents obesity in mice. Clinical Science 130.2: 105-116. Assay: Adipolysis in mouse cells. Yuan, Xiaoxue, et al (2016). Rutin ameliorates obesity through brown fat activation. The FASEB Journal 31.1: 333-345. Assay: Adipolysis in mouse cells. Chandrasekaran V., Amit A. et al (2013). Effect of Nelumbo nucifera Petal Extracts on Lipase, Adipogenesis, Adipolysis, and Central Receptors of Obesity. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine. 2013: 10.1155/2013/145925 Assay: Adipolysis in cell lines. Li R et al (2012). Neuropeptide Y potentiates beta-adrenergic stimulation of lipolysis in 3T3-L1 adipocytes. Regul Pept. 178(1-3):16-20. Assay: Adipolysis in mouse adipocytes.To find more recent publications, pleaseclick here.
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电泳缓冲液浓度对实验时间有影响。(如下案例)试验在20-40mmol/L范围内考察了醋酸铵浓度对4中组分分离度的影响。结果发信啊4中组分的迁移时间随醋酸铵浓度的增大而延长,从而分离度得到改善。但是缓冲液浓度越大分析时间也越长,如图3-3所示。向左转|向右转
跑了几次SDS-PAGE,发现缓冲液里有碎屑之类的东西,是不是该换新的了?
还有就是胶板用什么洗比较干净,干了之后没水印?
电泳缓冲液的ph为8.6时为什么会向正极移动
电泳法的电泳缓冲液123
未成年NF162021-08-14
电泳缓冲液还有一个组分是EDTA(乙二胺四乙酸),加入浓度为1-2mmol/L,目的是螯合Mg2+ 等离子,防止电泳时激活 DNA酶,此外还可防止Mg2+离子与核酸生成沉淀。
此外,我们常常用“电泳法”判断液体的性质,是胶体还是溶液。在高中化学中我们就用过这种方法判断给定的液体是否为胶体。向左转|向右转
在《分子克隆》上看见检测微量的DNA可以使用先电泳,再用含EB的电泳缓冲液染色30至45分钟。
我使用的是1%琼脂糖凝胶,电泳缓冲液为0.5×TBE。
请问各位大虾,在不影响实验结果的前提下,这样的含EB的电泳缓冲液可以反复使用多少次?

谢谢^_^
最近刚开始跑SDS-PAGE,很奇怪,加样后,Marker和样本停在加样孔不往下面跑!且跑电泳时,电压(80V)一直上不去,后测电泳液PH值,不到8.0,这是主要原因吗?

如需调PH,是用NaOH吗?
DNA分子在高于其等电点的pH溶液中中带负电,因为所说的等电点是指蛋白质或两性电解质所带净电荷为零时溶液的pH,此时蛋白质或两性电解质在电场中的迁移率为零.当外界溶液的pH大于两性离子的等电点值,两性离子释放质子带负电;当外界溶液的pH小于两。
没什么实质性的差别。制胶、作为电泳缓冲液都可以。不过作为电泳缓冲液时,0.5×TBE更容易变热。

如果你是制胶或者做电泳缓冲液的话,不用灭菌。
TE缓冲液 123
☆你大爷☆pgyn2021-07-29
TE缓冲液是Tris +EDTA缓冲液,这种缓冲液我们一般用作溶解剂或保持剂,主要是调控PH,TAE是一种电泳缓冲液,主要用于DNA分子的电泳。 TE组成浓度:10mM Tris-HCl 1mM EDTA PH=8.0 配制量:500ml 配制方法:量取下列溶液于500ml烧杯中 1M Tris-HCl Buffer PH=8.0 5ml 0.5M EDTA PH=8.0 1ml 向烧杯中加入约400mldd H2O均匀混合;将溶液定容到500ml后,高温高压灭菌;室温保存.
TAE是使用最广泛的缓冲系统。其特点是超螺旋在其中电泳时更符合实际相对分子质量(TBE中电泳时测出的相对分子质量会大于实际分子质量),且双链线状DNA在其中的迁移率较其他两种缓冲液快约10%,电泳大于13kb的片段时用TAE缓冲液将取得更好的分离效果,此外,回收DNA片段时也易用TAE缓冲系统进行电泳。TAE的缺点是缓冲容量小,长时间电泳(如过夜)不可选用,除非有循环装置使两极的缓冲液得到交换。 50×TAE Buffer 配制方法: 1. 称量Tris 242g,Na2EDTA.2H2O 37.2g 于1L烧杯中; 2.向烧杯中加入约800ml去离子水,充分搅拌均匀; 3加入57.1ml的冰乙酸,充分溶解; 4.加去离子水定容至1L后,室温保存。向左转|向右转
1.高效毛细管电泳中的缓冲液两瓶里装的是一种吗?
2.如果不是,两种缓冲液怎么选择?哪个放在阳极,哪个放在阴极?哪边是阳极?哪边是阴极?进样品的一端是阴极吗?
3.缓冲液的pH怎么确定?
让各位见笑了!谢谢!
保存得当,确保缓冲液没受污染,没长毛的话,就可以用。
但是最好还是不要用,影响实验就不好了。
目前常用的SDS-PAGE电泳缓冲液有:
Tris-Glycine/SDS;
MOPS/SDS;
Bis-Glycine/SDS等不同的缓冲液、预混液等。
不知道这几种缓冲液有什么异同呢?
比如如果是Invitrogen的预制胶-预混液电泳系统,每种预制胶有适配缓冲液,但是如果用其他的缓冲液似乎也可以得到不错的结果,那么是否说明电泳缓冲液只要满足了缓冲ph范围,其他的不是特别重要呢?
此外,附加提问是,PVDF膜在转膜的时候,转膜缓冲液中不需要加入甲醇,那么是加入甲醇转膜效果好还是不加好呢?
谢谢!
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