【求助】细胞裂解液加多少量?
2021-07-29
问题描述:
我是提细胞总蛋白的,6cmdish,我现在是用250ul裂解液的量,可是测出来的蛋白浓度比较低(1ug/ul),提细胞前在显微镜下看了细胞长满了,是不是我的裂解液量加的太多了,应该加多少量比较适合?请教。
*请输入10-500个字符
已帮助
0人
0人
zhangjinbo0661
用户
【1】哈,可以把裂解液用量调整为50-100微升。【2】加入裂解液后可以加用超声破碎细胞。【3】提完细胞的器具可以在显微镜下看一下,剩余的细胞还多不多。如果还多,说明细胞提取的不彻底,还要改进方法,争取提取的细胞彻底一些。
已帮助
0人
0人
zebrafishtom
用户
一般推荐量是10cmdish/500ul.其他体系根据培养细胞表面积类推.如果细胞特殊,则量还需更改.
已帮助
0人
0人
dennistt
用户
加入裂解液时一般每10^6个细胞加入0.1ml裂解液。是如果此条件下最终提取物蛋白浓度应该不低于5mg/L。一般情况下,可参考下述的使用条件,但细胞数目会因细胞的大小而变动,对于特别大或特别小的细胞,需要自行计数,摸定条件。6孔板的单孔(1~2×10^6细胞),加入0.1~0.2ml;25cm^2培养瓶(3~6×10^6细胞),加入0.3~0.6ml;75cm^2培养瓶(1~2×10^7细胞),加1~2ml。
已帮助
0人
0人
maxq301
用户
1、我的培养瓶是25的,每次用200μg的细胞裂解液,蛋白很浓2、建议用细胞刮刀,冰上裂解
已帮助
0人
0人
zhtwll2005
用户
谢谢大家的帮助!
已帮助
0人
0人
寓意
用户
灰常感激撸主
▍
相关分类
▍
相关文章
Domains Category List : R(153) R 单词类别
ImmunoChemistry公司
猪MMP9定量EIA试剂盒使用说明_实验方法_
Homemade Taq Polymerase Purification 蛋白纯化 资讯 生物在 ...
Home CtrlAqua
默克中国2019校园招聘招聘信息_公司简介_地址_电话 ...
Western blot转膜时发现其他的marker都转到膜上,17的maker没转...
silvaco中文使用手册 教程下载 21ic电子技术资料下载站
关于Agilent电泳仪的小问题_毛细管电泳(CE)_色谱_仪器论坛
生化分析仪原理及常见检测项目找我测
色谱制样方法_资讯✔
关于浙江大学杭州国际科创中心实验家具项目的中标结果公告[浙江...
▍
相关问答