【求助】invitrogen的T4连接酶
2021-07-31
问题描述:
大家有用过Invitrogen的T4连接酶吗?说明书上是23-26度连接,一般的连接酶不都是16度吗?应该用多少度呢?另外,说明书上还说连接后为了达到更好的转化效率,应将连接反应液至少稀释5倍再转化,是这样吗?谢谢大家帮忙啊
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jcnapoleon
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4度冰箱过夜连接也能连上
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ninthicee
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现在很多连接酶都建议在室温,而且10-15min。按照说明书来,问题不大的。至于是否要稀释,你可以多转化几管啊,,稀释的,没稀释的就可以保证没有问题了啊。一般我是20ul体系,取5-10ul直接转化的。
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jlcccs
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学习了,马上要做呢
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herrich1984
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我试过稀释和没稀释的。稀释5倍的有50个左右菌,没稀释的就1个。
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biocrysrain
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照着说明书做吧,她们的T4还是很好用的
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whbf5
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我们一般都只做5微升的体系,16度过夜是效果较好的,实在不行的室温过夜也可以,快速连接体系的话就不要链接太长时间。
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