请使用支持JavaScript的浏览器! +,Signal Seeker Kit, Ubiquitin, ubiquitination, ubiquitylation, antibody, anti-ubiquitin, polyubiquitin, monoubiquitination, monoubiquitin, monoubiquitylation, ubiquitin chains, sumoylation, proteosome, cellular localization, signal transduction, signal pat蚂蚁淘商城
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Cytoskeleton/Signal-Seeker™ Ubiquitination Detection Kit (10 assay)/10 assays/BK161-S
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Cytoskeleton/Signal-Seeker™ Ubiquitination Detection Kit (10 assay)/10 assays/BK161-S
品牌 / 
Cytoskeleton
货号 / 
BK161-S
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Details
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The Signal-Seeker™ line of produts have been developed to allow simple analysis of key regulatory protein modifications by specialists and non-specialists alike. The comprehensive Signal-Seeker™ kits provide an affinity bead system to isolate and enrich modified proteins from any given cell or tissue lysate. The enriched protein population is then analyzed by standard western blot procedures using a primary antibody to the target protein

Product Uses Include

  • Investigate transient regulatory mechanisms
  • Measure signalling events of multiple pathway member proteins 
  • Discover new modifications of your protein of interest
  • Gain insight into regulatory mechanisms
  • Measure endogenous or transiently expressed protein signalling events

Validation Data: Ubiquitination Detection Kit White Paper

Click Here for Detailed Methods

 

Kit contents

The Ubiquitination kit contains the following components:

Lysis and protein quantitation stepIP and pre-clear stepWash stepElution stepWestern step

 BlastR™ Lysis Buffer 

 BlastR™ Dilution Buffer

 BlastR™ Filters

 Protease Inhibitor Cocktail

 De-Ubiquitinase inhibitor  Cocktail

 Precision Red™ Protein  Assay Reagent

 Ubiquitination Affinity  Beads

 Ubiquitination Control  Beads

 

 

 

 

 BlastR™ Wash  Buffer

 

 

 

 

 

 Spin Columns

 Bead Elution  Buffer

 

 

 

 

 Chemiluminescent  Reagent A

 Chemiluminescent  Reagent B

 Anti-ubiquitin-HRP  antibody

 

 

 

 

Example results

There are many applications for these kits (see next section below), here we describe an interesting application for Rac1 protein:

Application 1: Investigate highly transient regulation events

The activity of the Rho family of proteins, including Rac1, is known to be regulated, in part, through ubiquitination (also termed ubiquitylation) events that can lead to signaling pathway regulation via degradation and/or localization of the modified protein (Visvikis, O. et al. 2010. Biol. Cell 102: 377-389. Nethe, M., & Hordijik, P.2010. J. Cell Sci. 123: 4011-4018). In many cases, the GTP-bound active form of Rac1 is the preferred substrate for ubiquitination. For example, it has been shown that cells treated with the bacterial toxin CNF1 leads to constitutive activation of Rac1 and subsequent mono- and poly-ubiquitination (Pop, M. et al. 2004. J. Biol.Chem. 279: 35840-35848).
Using the Signal-Seeker™ Ubiquitination Detection Kit (Cat # BK161) we examined the ubiquitination of endogenous Rac1 in 3T3 cells treated with CNF1 toxin (Cat # CN04) and found that both mono- and polyubiquitination of Rac1 could be detected from 300 μg of 3T3 cell lysate. The kit offers a user friendly tool to examine mono- and poly-ubiquitination for any target protein.
CUB02_product_page_figure

Figure 1: Swiss 3T3 cells were pre-treated with MG-132, then either untreated or treated with CNF1 (CN04) for 3 hours prior to lysis with BlastR buffer. The BK161 kit was utilized to perform the IP on 300 μg of lysate per condition. Lane 1: 3 μg input untreated lysate, Lane 2: Ubiquitin Affinity beads (UBA01) plus untreated lysate, Lane 3: UBA01 plus CN04 treated lysate, Lane 4: ubiquitin control beads (CUB02) plus untreated lysate, Lane 5: CUB02 plus CN04 treated lysate. Samples were analyzed for Rac1 ubiquitination using an anti-Rac1 antibody.

Other experiments that could be attempted in this area of research include:
 
• Pharmacological investigation of ubiquitinases or de-ubiquitinases involved in Rac1 mono- and poly-ubiquitination
 
• Investigation of the relationship between Rac1 activation and ubiquitination under a variety of different growth factors or drug treatments.
 
• Examine the interaction of ubiquitinated Rac1 with effectors.
 
• Examine crosstalk between ubiquitinated Rac1 and other regulatory PTMs of Rac1.

For more information contact:  signalseeker@cytoskeleton.com

Associated Products:

Signal-Seeker™ Phosphotyrosine Detection Kit (Cat. # BK160)

Signal-Seeker™ SUMOylation 2/3 Detection Kit (Cat. # BK162)

Signal-Seeker™: BlastR™ Rapid Lysate Prep Kit (Cat. # BLR01)

Signal-Seeker™ Ubiquitin Affinity Beads (Cat.# UBA01-beads)

Signal-Seeker™: PTMtrue™ Ubiquitin Antibody (Cat.# AUB01)

About

 

Click on the pdf icon below to download the manual

    Citations
    AuthorTitleJournalYearArticle Link
    Afrin, Sadia et al.Sim******* modulates estrogen signaling in uterine leiomyoma via regulating receptor palmitoylation, trafficking and degradationPharmacological Research2021ISSN 1096-1186
    Tumova, Lucie et al.The ubiquitin-proteasome system does not regulate the degradation of porcine β-microseminoprotein during sperm capacitationInternational Journal of Molecular Sciences2020ISSN 1422-0067
    Gu, Chunming et al.Identification of berberine as a novel drug for the treatment of multiple myeloma via targeting UHRF1BMC Biology2020ISSN 1741-7007
    Chu, Yi et al.O-GlcNAcylation of SIX1 enhances its stability and promotes hepatocellular carcinoma proliferationTheranostics2020ISSN 1838-7640
    Uchiyama, Makoto et al.O2-Dependent Protein Internalization Underlies Astrocytic Sensing of Acute Hypoxia by Restricting Multimodal TRPA1 Channel ResponsesCurrent Biology2020ISSN 1879-0445
    Sen, Arpita et al.The Na+ pump Ena1 is a yeast epsin-specific cargo requiring its ubiquitylation and phosphorylation sites for internalizationJournal of Cell Science2020ISSN 1477-9137
    Park, Jin Suk et al.Mechanical regulation of glycolysis via cytoskeleton architectureNature2020ISSN 1476-4687
    Faqs

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    If you have any questions concerning this product, please contact our Technical Service department at tservice@cytoskeleton.com

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    Western Blot MaterialsSemi-dry Transfer ApparatusBiorad, Cat# 170-3940, or equivalentPower Supply0 - 100 VDC (adj. current to 1 Amp)Immobilon-P transfer membra 查看更多>
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    请问一个免疫组化试剂盒能做多少张切片、。我有60只小鼠的肌肉组织要做免疫组化,请问需要几个试剂盒?试剂盒的单价一般多少呢?求助
    大家好!我实验下一阶段准备做ELISA,检测人的韧带组织中的蛋白。
    蛋白的类型为PDGF。其有一种二聚体为PDGF-BB。
    请教第一点:我看了Elisa的说明书,现在检测PDGF有两种试剂盒,一种是检测PDGF的,要求的试剂样本为组织匀浆;一种是检测PDGF-BB的,要求的待测样本为血液或血浆。
    我现在的实验目的是想更精确,检验组织中的PDGF-BB,但是手中的是人体韧带组织样本,非PDGF-BB试剂盒所要求的组织样本为血浆或血清,我不知道是否可以用PDGF-BB的ELISA试剂盒的来做,所以特地请教:)
    请教第二点:市面上有RB公司的96T,2500元;另外有Uscnlife的Elisa试剂盒,96T的3680元,都说是原装进口的,我该如何选择呢?为何差价这么多?谢谢指点!
    免疫组化试剂盒检测标本的数量和你盒子大小有直接关系,盒子大的检测的就多!
    最近想做个免疫组化试验,因为从来没做过,所以保险起见想先用进口试剂,请问一下进口试剂哪个牌子比较好,...
    最近想用免疫组化鉴定干细胞原代细胞,想了解国内哪家公司的免疫组化试剂盒做得最好、最专业?
    福州迈新和北京康为相比,哪个比较好?还有博士德、中杉金桥都怎么样?
    不管报价,只要品质,国产IHC试剂盒中最好的,请各位大侠不吝指教,谢谢!
    用哪家公司的免疫组化试剂盒好一些?打算用SABC染色的,其他方法也行。
    elisa试剂盒抗体一般不能用于免疫组化。

    一、免疫组化试剂盒一般包括:
    1、特异性的一抗
    2、免疫组化检测系统。
    3、有的同时还具备显色系统。
    二、不同的公司内容有差别,所以购买时一定了解清楚:
    1、一抗是做人的还是兔、鼠的组织;
    2、检测系统是ABC/SP/非生物素/其他;
    3、试剂盒的内容都有什么?有没有显色系统?
    4、如果没有,自己根据前面的检测系统需配哪个显色系统。(其他的辅助试剂如PBS缓冲液、抗原修复液等一般另卖或自配)
    三、免疫组化抗体即指特异性一抗,是用来标记的指标,免疫组化过程的其他试剂一律另外配备。
    另外:做实验时,如遇出结果困难,记得做阳性片对照,敢于怀疑检测系统或显色系统的问题。
    免疫组化试剂盒,国产的和进口的,分别哪个牌子比较好啊?
    我做TUNEL和MMP-2、MMP-9的免疫组化,我知道TUNEL有专门的试剂盒,MMP-2、9可以共用一个试剂盒吧?
    免疫组化试剂盒是通用的吗?比如我要做小鼠MMp-9的,是买一种含兔抗鼠一抗的就行,还是必须要买MMP-9的兔抗鼠一抗才可以?
    各位战友大家好!我目前在做SD大鼠腹主动脉球囊损伤模型,模型刚刚建成,需要检验模型是否建成功。需要做一个免疫组化。可是咨询了几家试剂公司,都没有PCNA免疫组化的试剂盒。想咨询各位战友们,有谁知道哪家有卖SD大鼠血管PCNA免疫组化试剂盒的,请指点一二,哪家的试剂盒比较好。我的联系方式是463843267@qq.com。谢谢!
    本人是新手,近来要做大鼠肝脏α-SMA免疫组化,是否单单购买α-SMA免疫组化试剂盒就够了,试剂盒里面是否就包含一抗二抗等?是否需要购买其他试剂?还是一抗、二抗分开来买?谢谢!