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TwistDx/TwistAmp® Liquid exo RT/TALQEXORT01/
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TwistDx/TwistAmp® Liquid exo RT/TALQEXORT01/
品牌 / 
TwistDx
货号 / 
TALQEXORT01
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Description:

Onestepreal-timefluorescentRNAamplificationinaflexIBLeliquidformat.RecommendedforuserswhowanttocombineTwistDx’sRPAtechnologytodetectRNAtargetswiththeuseofTwistDx"sproprietaryfluorescentTwistAmp®exoprobe.ItcontainsthereagentcomponentsofaTwistAmp®Liquidexokitaswellasacompatiblereversetranscriptase,whichconvertstheinitiallypresentRNAtemplateintoDNAandthusintoamplificationsubstrates.Theuserneedonlysupplyprimers,probe,dNTPs,templateandRNaseInhibitor.Seemanualformoreinformation.Clicktoorderoligonucleotides.

Perfectfor:Real-timefluorescentRNAdetection,facilitatinguseofdifferentRPAreactionvolumes,orvariationofcomponentratios.

Productcode: TALQEXORT01

Features

  • combinedreversetranscriptionandrapidCDNAamplificationinonestep
  • real-timeprobedetection
  • flexiblereactionvolumeuse
  • flexiblereagentcomponentratiouse
  • singlemoleculedetection
  • reagentsforatleast100reactions(dependentonvolumeused)
  • multiplexable
NB:Duetocurrentproductionmethods,RPAreactionsarenotsuitableforamplificationofstandardlaboratorystrainsof E.coli. Ifyouareinterestedinamplifying E.coli DNA,pleasecontact techsupport@twistdx.co.uk

英国TwistDx公司成立于1999年,是基于英国剑桥Babraham研究院建立的生物技术公司。该公司通过突破等温DNA扩增,开发的重组酶聚合酶扩增专利技术(RPA),被誉为DNA诊断领域的革命性创新。核心产品:产品名称货号描述检测方法TwistAmp®BasicTABAS03KIT用于DNA快速扩增终点凝胶电泳DNA检测,下游应用(如:亚克隆)TwistAmp®exoTAEXO02KIT实时荧光DNA扩增实时荧光DNA检测TwistAmp®LiquidBasicTALQBAS01液体形式DNA快速扩增终点凝胶电泳DNA检测,下游应用(如:亚克隆)TwistAmp®LiquidexoTALQEXO01液体形式实时荧光DNA扩增实时荧光DNA检测TwistAmp®nfoTANFO02KIT测流层析检测DNA扩增侧流层析试纸条检测应用:TwistDx公司开发的重组酶聚合酶扩增(RPA),被称为是可以替代PCR的核酸检测技术。以此为基础的TwistAmp 核酸扩增产品,能够在15分钟内进行常温下的单分子核酸检测。该技术对硬件设备的要求很低,特别适合用于体外诊断、兽医、工业应用,食品检测,农业,公共卫生,生物安全和环境感知等相关领域。RPA反应的最适温度在37℃~42℃之间,无需变性,常温下即可反应,大大加快了PCR的速度。并且由于不需要温控设备,RPA可以真正实现便携式的快速核酸检测。RPA检测的灵敏度很高,能够将痕量的核酸(尤其是DNA)模板扩增到可检出水平,从单个模板分子得到大约1012扩增产物。无需复杂样品处理,即可实地检测;既可扩增DNA也可扩增RNA,省去额外的CDNA合成步骤;检测方式多样:终点检测、对扩增过程进行实时监控或通过侧流层析试纸条(LFD)读取结果。


英国TwistDx公司(前身为ASM科技有限公司)成立于1999年,基于英国剑桥Babraham研究院建立的生物技术公司。该公司通过突破等温DNA扩增,开发的重组酶聚合酶扩增专利技术(RPA),被誉为DNA诊断领域的革命性创新。TwistDx以此技术为基础生产的核酸扩增类产品,能在恒定且较低的温度下,仅用10~20分钟,进行单分子核酸检测。这一技术对环境、硬件设施的要求很低,对于生物防护、水体检验、食品检验、医疗诊断、微流体、兽医等方面都有良好的应用。RPA扩增的各种体系试剂盒中,含有DNA、RNA扩增所需的所有试剂,研究者只要准备好引物和模板就行了。扩增结果可以分别通过凝胶电泳检测、荧光定量检测或试纸条检测,产物纯化后可用于下游研究。苏州蚂蚁淘生物科技有限公司是最早将英国TwistDx公司PRA技术和产品引入中国的经销商,与TwistDx公司建立了长期的战略合作关系,请将长期致力于PRA技术在中国的推广!接TwistDx厂家通知:工厂搬迁完成,自10月15日起可正常下单订货,感谢各位新老客户多多支持!最新产 品列表:TABAS03KIT-TwistAmp?BasicKitTAEXO02KIT-TwistAmp?exoKitTANFO02KIT-TwistAmp?nfoKitTALQBAS01-TwistAmp?LiquidBasicKitTALQEXO01-TwistAmp?LiquidexoKitUSTAR01-U-Starcassette(packof20)MILENIA01-MileniaHybritech1(packof100) 


 TwistDx全新的液态重组酶聚合酶扩增(RPA)试剂盒,这些试剂盒非常适合需要不使用热循环仪就能在15分钟内完成DNA/RNA扩增的实验室以及想要灵活构建试验体系的研究人员使用。TwistAmp® Liquid试剂盒提供经甘油稳定化处理的液态RPA试剂,该形态对于在实验室执行PCR和其他基于酶的反应的任何人来说都非常熟悉。这些试剂各自装于单独的试管中,用户可随意从中移取任何量的酶混合液来构建自己所选的RPA反应体积,配制用于多次反应的预混液,或者以各种RPA组分比例进行实验以优化试验。除了具有室温稳定性的冻干态TwistAmp®RPA试剂盒这一旗舰产品,本次新推出的 TwistAmp®Liquid试剂盒是现场或定点试验开发的理想之选。液体形态让实验室更容易地在日常工作中使用快速简单的RPA法(该方法有时甚至采用与PCR相同的引物)取代PCR法,以及更容易地开发出定制的试验。

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重组酶T4uvsX,单链结合蛋白T4gp32,2mM DTT,购于TwistDX;模板等);在PCR管管2中添加100μL50μg/mL MnO2和20μM钙黄绿素;管3添加100μL 500μM焦磷酸盐... 查看更多>
货号:PKT0051K 查看更多>
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一个月内,顶级学术期刊连发两篇顶级论文!上半年引爆生物圈的华人科学家张锋教授团队又有新动作!这次,他在一月内,分别在《Nature》、《Science》连发两篇论文!他将CRISPR-Cas13a改造成了灵敏度达到了阿摩尔级(aM,10的负18次方摩尔每升),可以检测单分子的SHERLOCK技术。而这其中,RPA起到了不小的作用。那么,什么是RPA呢?RPA,即重组酶聚合酶扩增技术,是在由多种酶和蛋白的参与下,在恒温条件下实现核酸指数扩... 查看更多>
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主要是该方法使用了Bst酶,双链的DNA有一个特性,就是在65度时双链之间的结合较为松散,称之为动态平衡状态,所以不需要预变性使双链解开,而Bst酶在65度时的活性是最高的,这样LAMP反应就能正常进行了
大家好,现在做LAMP结果颠倒了,阴性对照会出现LAMPladder条带,而加了基因组DNA的反而扩增不出来,有没有人遇见这种情况?最后如何解决了呢?
本人利用总RNA做NASBA一直没有扩增结果求帮助
下图是NASBA的实验结果图
1-Markerds2000
2,3为平行试验其RNA的浓度均为10X4
4为只有模板的RNA样品的对照
比较简易的装置,可携带。但是通量小
有人知道交叉引物核酸恒温扩增(CPA)的扩增原理吗?希望高手不吝赐教,最好是图文并茂的那种,谢谢了先!
就是原跟过程不一样,结果都一样的吧?不懂啊
PCR技术在食品检测中的应用123
绿萝2015的春天2018-01-24
应用很广泛,因为比荧光定量PCR的操作简单方便,无需专业人员操作,仪器的性价比也比较高,挺受食品企业的追捧,食药系统也用的不少,现在技术越来越成熟,以后的应用会越来越广
基因扩增技术(PCR)聚合酶链反应(polymerase chain reaction简称PCR)又称无细胞分子克隆系统或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增法,是基因扩增技术的一次重大革新。可将极微量的靶DNA特异地扩增上百万倍,从而大大提高对DNA分子的分析
欢迎加入环介导的恒温扩增法(LAMP)讨论群70918628
实验三PCR扩增制备目的基因123
南昌中洪博元小梅2016-05-09

1.目的
学会PCR操作的基本技术。

2.原理
是将待扩增的DNA模板加热变性,与其两侧互补的寡聚核苷酸引物复性,然后经过耐热的DNA聚合酶延伸。再进入下一轮变性—复性—延伸的循环,n次循环后DNA可被扩增(1+X)n倍。其中<25nt的引物退火温度Tm=2(A+T)+4(G+C)。

3.器材
旋涡混合器,微量移液取样器,移液器吸头,0.2mlPCR微量管,双面微量离心管架,PCR仪,台式离心机琼脂糖凝胶电泳系统,水漂,恒温水浴。

4.试剂
5U/μlTaqDNA聚合酶,PCR缓冲液(10×,MgCl2free),25mMMgCl2,dNTP,引物,模板质粒pBS-CHI,无菌ddH2O。

5.实验准备
dNTP混合液(每种25mM),TAE电泳缓冲液荧光染料,10´加样缓冲液,1.5ml离心管装入铝制饭盒(灭菌)、移液器吸头装入相应的吸头盒(灭菌)。合成的引物:Senseprimer5'-GGATCCACAATGATGAGAGCC-3'
Antisenseprimer5'-GATATCATGGTGAGGTAGCTAGCTT-3'

目的基因模板质粒:已经克隆在pBS载体上的1128bp几丁质酶(chitinase,CHI)基因。
待扩增的CHI片段长度:996bp。

6.操作步骤
(1)在0.2mlPCR微量离心管中配制50μl反应体系。(以下加样量供参考,括号内是最终需要量,实验时需参照Taq酶说明书计算)
ddH2O32μl
10×PCRbuffer(不含MgCl2)5μl
25mMMgCl23μl
2.5mmol/LdNTP4μl(每种dNTP终浓度0.2mM)
10μmol/LPrimer12μl(12.5~25pmoles)
10μmol/Lprimer22μl(12.5~25pmoles)
模板质粒1μl(1×10-3pmoles)
5U/μlTaq酶1μl(5U)
总体积50μl

(2)根据厂商的操作手册设置PCR仪的循环程序:
①94℃5min
②94℃1min
③54℃1min
④72℃1min50s
⑤goto②29times
⑥72℃10min
(3)PCR结束后,取10μl产物进行琼脂糖凝胶电泳。观察胶上是否有预计的主要产物带。
(4)清理桌面,撰写实验报告。
(5)PCR产物可以直接与T载体连接(见实验五),然后转化感受态细胞(见实验八)。

7.思考
(1)复性温度如何确定?
(2)为什么要在最后延伸10min?
(3)是否有非特异性扩增产物(或引物二聚体),如何才能消除?

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(1)严格分区操作,样品提取区、配液区、扩增区、检测区应相互独立,各区耗材及移液器应专用,实验前先用紫外线消毒以破坏残留的核酸。
(2)操作多份样品时,应先配制反应混合液并分装,减少操作,避免污染,同时增加反应的精确度。试剂的配置和分装应在装有紫外灯的超净工作台或负压工作台操作。
(3)移液器和吸头需专用。由于移液器极易受气溶胶或模板核酸的污染,移液器应尽可能使用可替换或可高压处理的,吸头尽可能使用带滤芯的吸头。
(4)防止操作人员污染,使用一次性手套,EP管与吸头应一次性使用,吸头不要长时间暴露于空气中,避免气溶胶的污染。
(5)加样或吸取模板核酸时要十分小心,吸样要缓慢,防止样品进入移液器内;吸样时尽量一次性完成,忌多次抽吸,以免交叉污染或产生气溶胶污染。
(6)EP管打开应先离心,将管壁及管盖上的液体甩至管底部。开管动作要轻,以防管内液体溅出。若不小心溅到手套或桌面上,应立刻更换手套并用稀酸擦拭桌面。
(7)模板核酸应密封保存,防止外溢及外来核酸的进入。
(8)设立适当的阴阳性对照及重复实验,既可验证LAMP反应的准确性,又可以协助判断扩增系统的可信性。
(9)扩增产物应妥善处理,尽量避免开盖检测,开盖极易产生气溶胶污染。本公司的试剂均采用闭管检测,有效防止污染发生。展开
应用很广泛,因为比荧光定量PCR的操作简单方便,无需专业人员操作,仪器的性价比高,挺受食品企业的追捧,食药系统也用的不少,现在技术越来越成熟,以后的应用会越来越广