Contents | amfiEco Taq DNA Polymerase, 1u/ulamfiEco 2X Reaction Buffer |
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Application | Routine Robust PCR |
amfiEcoTaq DNA Polymeraseis a thermostable DNApolymerase that possesses a 5' -> 3' polymerase activityand a double-strand specific 5' ->3' exonuclease activity.2X amfiEco PCR Master buffer including dNTPs andMg++ minimises reagents handling steps and reducethe risk of contamination.
To perform PCR, simply add water, primers and templateto resuspend the reaction mixture, and cycle.For addedconvenience,amfiEcoTaq DNA Polymerasecontainsred and yellow loading dyes to allow loading of PCRproduct directly on a gel after thermal cycling, minimizingpipetting steps and providing easy visualization of sample.The red dye runs in a range between 500bp (2% gel) and1500bp(0.8% gel) and the yellow dye runs at less than10bp.
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只要是细胞,就得走向衰老,现代研究表明,细胞的衰老和端粒的变短有关系。端粒就是DNA,随着细胞分裂次数的增多,端粒在不断变短,端粒酶就是组织端粒变短的。然而正常细胞中,端粒酶的活性受抑制,端粒酶是怎么染端粒变长的呢?实际上端粒酶是由RNA组成的,可以根据碱基互补配对逆转形成DNA,使得变短的端粒变长。所以说端粒酶可以逆转录形成端粒,使端粒不减短!
各位大侠:小弟最近做个长片段的CDNA与T载体的连接,片段大小6.4K,载体选用的是pUC19和pGEMT-easy,反转录酶用的是RevertAidTirstStrandcDNASynthesisKit(#K1621),CDNA第二链的扩增用的是LATaq。我是用纯病毒的RNA做模板,操作步骤严格按照说明做的,也曾经有一次获得过电泳图清晰显示的是全长6.4KB左右的片段,与载体连接,结果筛选到的几个克隆,插入的片段仅有2KB左右,奈何?可最近几次再用此反转录试剂盒却不能得到所需片段。在此,小弟想问问大家,你们是否遇到同样的问题,是如何解决的?所用的试剂(载体和酶的选择)和方法是什么,可以告诉后来者,共同进步吧。
我在做5RACE,选用TaKaRa公司的RNA反转录酶(RNaseH-),不知道这个酶好不好,有什么需要注意的。
2. 禽成髓细胞瘤病毒(AMV)反转录酶:有强的聚合酶活性和RNA酶H活性。最适作用温度为42℃。
3.Thermus thermophilus、Thermus flavus等嗜热微生物的热稳定性反转录酶:在Mn存在下,允许高温反转录RNA,以消除RNA模板的二级结构。
4.MMLV反转录酶的RNase H突变体:商品名为SuperScript 和SuperScriptⅡ。此种酶较其它酶能多将更大部分的RNA转换成cDNA,这一特性允许从含二级结构的、低温反转录很困难的mRNA模板合成较长cDNA。向左转|向右转
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