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U-protein/CTLA4-ECD, mus musculus/C006/0.1 mg
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U-protein/CTLA4-ECD, mus musculus/C006/0.1 mg
品牌 / 
U-Protein
货号 / 
C006
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RecombinantCTLA4-ECD

Producedinamammaliancellline.

Alternativenames:
CytotoxicT-lymphocyteprotein4isoform
CTLA4-TM
CytotoxicT-lymphocyte-associatedserineesterase-4
CytotoxicT-lymphocyte-associatedantigen4
CytotoxicT-lymphocyteprotein4
LigandandtransmembranesplicedcytotoxicTlymphocyteassociatedantigen4
CytotoxicT-lymphocyteantigen4
CD152isoform
CytotoxicTlymphocyteassociatedantigen4shortsplicedform


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U-proteinExpressBV是一家专门的合同研究机构,提供用于研究和临床前应用的(哺乳动物)重组蛋白抗体的快速大规模生产,并在位于荷兰乌得勒支乌得勒支科学公园的最先进实验室设施中运营。员工在DNA克隆、哺乳动物细胞培养和蛋白质生产方面经验丰富。自2002年以来,已为生物技术、制药工业和学术界生产了5000多种不同的重组抗体和蛋白质。


U-ProteinExpress的rPEX技术基于HEK293或CHO细胞系中的瞬时蛋白生产,成功率超过90%,可以生产难以表达的蛋白质,如双特异性抗体和抗原


U-ProteinExpress蛋白纯化原则

蛋白纯化要利用不同蛋白间内在的相似性与差异,利用各种蛋白间的相似性来除去非蛋白物质的污染,而利用各蛋白质的差异将目的蛋白从其他蛋白中纯化出来。每种蛋白间的大小、形状、电荷、疏水性、溶解度和生物学活性都会有差异,利用这些差异可将蛋白从混合物如大肠杆菌裂解物中提取出来得到重组蛋白

蛋白的纯化大致分为粗分离阶段和精细纯化阶段二个阶段。一般蛋白纯化采用的方法为树脂法。粗分离阶段主要将目的蛋白和其他细胞成分如DNA、RNA等分开,由于此时样本体积大、成分杂,要求所用的树脂高容量、高流速、颗粒大、粒径分布宽.并可以迅速将蛋白与污染物分开,必要时可加入相应的保护剂(例如蛋白酶抑制剂),防止目的蛋白被降解。精细纯化阶段则需要更高的分辨率,此阶段是要把目的蛋白与那些分子量大小及理化性质接近的蛋白区分开来,要用更小的树脂颗粒以提高分辨率,常用离子交换柱和疏水柱,应用时要综合考虑树脂的选择性和柱效两个因素。选择性指树脂与目的蛋白结合的特异性,柱效则是指各蛋白成分逐个从树脂上集中洗脱的能力,洗脱峰越窄,柱效越好。仅有好的选择性,洗脱峰太宽,蛋白照样不能有效分离。



U-ProteinExpress重组抗体使制备人源化抗体和人源抗体成为可能,而这是其他常规的多克隆或单克隆抗体制备方法所不可能做到的。主要包括四个方面的技术:抗体库技术,包括组合抗体库、噬菌体抗体库、细菌和酵母展示的抗体库、核糖体展示的抗体库及其抗体库的筛选技术;重组抗体基因的改造和表达,包括抗体亲和力成熟、抗体人源化改造和稳定性改造,以及抗体基因在原核、酵母、昆虫、哺乳动物细胞、植物及转基因动物中的表达;重组抗体效应功能的提高,涉及抗体与同位素、药物、毒素结合的"导向药物"、双特异性抗体、抗体一酶融合蛋白、免疫细胞因子及细胞内抗体;抗体特异性分析和鉴定,主要介绍抗体的分离和纯化、抗体标记技术、抗体亲和力测定、抗体的抗原表位分析、抗体基因测序和结构模建,以及常用的抗体鉴定技术,如ELISA免疫组化、FACS分析、免疫沉淀和Westernblot等。本书涵盖了当前重组抗体制备和改造中的大部分技术,因此对从事抗体研制的技术人员、生物技术公司及有关专业的大专院校师生均有一定参考价值。


U-ProteinExpress蛋白纯化步骤

分离纯化某一特定蛋白质的一般程序可以分为前处理、粗分级、细分级三步。

前处理
分离纯化某种蛋白质,首先要把蛋白质从原来的组织或细胞中以溶解的状态释放出来并保持原来的天然状态,不丢失生物活性。为此,动物材料应先剔除结缔组织和脂肪组织,种子材料应先去壳甚至去种皮以免受单宁等物质的污染,油料种子最好先用低沸点的有机溶剂如乙醚等脱脂。然后根据不同的情况,选择适当的方法,将组织和细胞破碎动物组织和细胞可用电动捣碎机或匀浆机破碎或用超声波处理破碎。植物组织和细胞由于具有纤维素、半纤维素和果胶等物质组成的细胞壁,一般需要用石英砂玻璃粉和适当的提取液一起研磨的方法或用纤维素酶处理也能达到目的。细菌细胞的破碎比较麻烦,因为整个细菌细胞壁的骨架实际上是一个借共价键连接而成的肽聚糖囊状大分子,非常坚韧。破碎细菌细胞壁的常用方法有超声波破碎,与砂研磨、高压挤压或溶菌酶处理等。组织和细胞破碎后,选择适当的缓冲液把所要的蛋白提取出来。细胞碎片等不溶物用离心或过滤的方法除去。
如果所要的蛋白主要集中在某一细胞组分,如细胞核、染色体核糖体或可溶性细胞质等,则可利用差速离心的方法将它们分开,收集该细胞组分作为下步纯化的材料。如果碰上所要蛋白是与细胞膜或膜质细胞器结合的,则必须利用超声波或去污剂使膜结构解聚,然后用适当介质提取。
粗分离
当蛋白质提取液(有时还杂有核酸、多糖之类)获得后,选用一套适当的方法,将所要的蛋白与其他杂蛋白分离开来。一般这一步的分离用盐析等电点沉淀和有机溶剂分级分离等方法。这些方法的特点是简便、处理量大,既能除去大量杂质,又能浓缩蛋白溶液。有些蛋白提取液体积较大,又不适于用沉淀或盐析法浓缩,则可采用超过滤、凝胶过滤、冷冻真空干燥或其他方法进行浓缩。
细分离
样品经粗分级分离以后,一般体积较小,杂蛋白大部分已被除去。进一步纯化,一般使用层析法包括凝胶过滤、离子交换层析、吸附层析以及亲和层析等。必要时还可选择电泳法,包括区带电泳等电点聚焦等作为最后的纯化步骤。用于细分级分离的方法一般规模较小,但分辨率很高。
结晶是蛋白质分离纯化的最后步骤。尽管结晶过程并不能保证蛋白一定是均一的,但是只有某种蛋白在溶液中数量上占有优势时才能形成结晶。结晶过程本身也伴随着一定程度的纯化,而重结晶又可除去少量夹杂的蛋白。由于结晶过程中从未发现过变性蛋白,因此蛋白的结晶不仅是纯度的一个标志,也是断定制品处于天然状态的有力指标。
离子层析法
当被分离的蛋白质溶液流经离子交换层析柱时,带有与离子交换剂相反电荷的蛋白质被吸附在离子交换剂上,随后用改变pH等办法将吸附的蛋白质洗脱下来。
有机溶剂提取
蛋白质纯化有机溶剂提取的原理是:与水互溶的有机溶剂(如甲醇、乙醇)能使一些蛋白质在水中的溶解度显著降低;而且在一定温度、pH值和离子强度下,引起蛋白质沉淀的有机溶剂的浓度不同,因此,控制有机溶剂的浓度可以分离纯化蛋白质。例如,在冰浴中磁力搅拌下,在4℃预冷的培养液中缓慢加入乙醇(-25℃),可以使冰核蛋白析出,从而纯化冰核蛋白。由于在室温下,有机溶剂不仅能引起蛋白质的沉淀,而且伴随着变性。因此,通常要将有机溶剂冷却,然后在不断搅拌下加入有机溶剂防止局部浓度过高,蛋白质变性问题就可以很大程度上得到解决。对于一些和脂质结合比较牢固或分子中极性侧链较多、不溶于水的蛋白质,可以用乙醇、丙酮丁醇等有机溶剂提取,它们有一定的亲水性和较强的亲脂性,是理想的提取液。冷乙醇分离法提取免疫球蛋白最早由Cohn于1949年提出,用于制备丙种球蛋白。冷乙醇法也是WHO规程和中国生物制品规程推荐的方法,不仅分辨率高、提纯效果好、可同时分离多种成分,而且有抑菌、清除和灭病毒的作用。



U-ProteinExpress常用产品报价单

产品名货号公司分类商城分类美金价
U-protein/Adrenocorticotropichormonemonoclonalantibody/P-Ab0001/100microgramP-Ab0001Antibodies功能性抗体300.00
U-protein/ComplementC2,human/C001/200microgramC001Complementproteins其它天然蛋白390.00
U-protein/Fam3D,human/F002/100microgramF002Cytokines细胞因子425.00
U-protein/Alkalinephosphatase,placenta,human,secreted(glycerolbuffer)/A002/0.25mgA002Enzymes其它酶475.00
U-protein/Beta2-GlycoproteinI/G002/0.1mgG002Haematology其他试剂420.00
U-protein/FSH,Daniorerio/F001/100microgramF001Hormones激素450.00
U-protein/CD36extracellulardomain,human/C007/100microgramC007Receptors受体750.00
U-ProteinExpress/Mannose-bindingproteinC/0.1mg/M001M001Complementproteins其它重组蛋白470.00



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产品名称: 胰岛素样生长因子-1 受体试剂盒 国内优质ELISA厂家 产品简介: 胰岛素样生长因子-1 受体试剂盒 国内优质ELISA厂家 ELISA试剂盒 国产现货 SIXIN生产的优质ELISA试剂盒直供全国。http://www.aatbio.com.cn/elisa/ 胰岛素样生长因子-1 受体试剂盒 国内优质ELISA厂家 进口试剂采购网,上海通善生物科技有限公司(BioLeaf)旗下生命科学研究B2C一站式采购平台。 进口试 查看更多>
2018-07-15
产品名称: 小鼠核因子κB受体活化因子配基(RANKL)ELISA Kit(elisa试剂盒) 国内优质ELISA厂家 产品简介: 小鼠核因子κB受体活化因子配基(RANKL)ELISA Kit(elisa试剂盒) 国内优质ELISA厂家 ELISA试剂盒 国产现货 SIXIN生产的优质ELISA试剂盒直供全国。http://www.aatbio.com.cn/elisa/ 小鼠核因子κB受体活化因子配基(RANKL)ELISA Kit 查看更多>
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受体的分类:
大多数药物在体内都是和特异性受体相互作用,改变细胞的生理生化功能而产生效应。目前已经确定的受体有30多种,根据受体存在的标准,受体可大致分为三类:
1.细胞膜受体:位于靶细胞膜上,如胆碱受体、肾上腺素受体、多巴胺受体、阿片受体等。
2.胞浆受体:位于靶细胞的胞浆内,如肾上腺皮质激素受体、性激素受体。
3.胞核受体:位于靶细胞的细胞核内,如甲状腺素受体。
另外也可根据受体的蛋白结构、信息转导过程、效应性质、受体位置等特点将受体分为四类:
1.含离子通道的受体(离子带受体):如N-型乙酰胆碱受体含钠离子通道。
2.G蛋白偶联受体:M-乙酰胆碱受体、肾上腺素受体等。
3.具有酪氨酸激酶活性的受体:如胰岛素受体。
4.调节基因表达的受体(核受体):如甾体激素受体、甲状腺激素受体等。
有些受体具有亚型,各种受体都有特定的分布部位核特定的功能,有些细胞也有多种受体。
受体除了是蛋白质,还可能是什么,请举几个例子
相关疾病:肺癌癌症非小细胞肺癌肿瘤前两天在奇点网上看到的资讯,感觉也是酷酷的:科学家发现β受体阻滞剂可阻断压力导致的肺癌耐药性,并抑制肿瘤生长。越来越多的研究表明,心理压力会促进癌细胞的生长、产生耐药性,以及转移。以至于临床将心理压力......

现在有一个实验需要看一种药物与受体的结合情况,想咨询一下放射性配体受体结合实验,因为我们不具备这个实验条件,最好能外包那种

受体(receptor)是细胞膜上的特殊蛋白分子,可以识别和选择性地与某些物质发生特异性受体结合反应,产生相应的生物效应。能与受体蛋白结合的物质,如神经递质、调质、激素和药物等,统称为受体的配基或配体。
受体是细胞在进化过程中形成的细胞蛋白组分,能识别周围环境中某种微量化学物质,首先与之结合,并通过中介的信息转导与放大系统,触发随后的生理反应或药理效应。自从Langley 提出受体学说100年后,受体已被证实为客观存在的实体,类型繁多,作用机制多已被阐明,现在受体已不再是一个空泛笼统的概念。受体分子在细胞中含量极微,1mg 组织一般只含10fmol左右。能与受体特异性结合的物质称为配体(ligand)。受体仅是一个“感觉器”,对相应配体有极高的识别能力。受体-配体是生命活动中的一种偶合,受体都有其内源性配体,如神经递质、激素、自身活性物(autocoid)等。能激活受体的配体称为激动药(agonist),能阻断其活性的配体称为拮抗药(antagonist)。根据受体与配体结合的高度特异性,受体被分为若干亚型,如肾上腺素受体又分为α1、α2、β1和β2等亚型,其分布及功能都有区别。受体与配体有高度亲和力,多数配体在1pmol~1nmol/L的浓度时即可引起细胞的药理效应。反应之所以如此灵敏主要是靠后续的信息转导系统,如细胞内第二信使(second messenger)的放大、分化及整合功能。酶、载体、离子通道及核酸也可与药物直接作用,但这些物质本身具有效应力,故严格地说不应被认为是受体。某些细胞蛋白组分可与配体结合,但没有触发效应的能力,称为结合体(acceptor)。
相关疾病:双相障碍高血压各位大佬求解释。贝塔(手机上没符号)受体拮抗药对血管和血压的影响,书上写了:使血管收缩,外周阻力增加,引起肝、肾、骨骼肌和冠状动脉血流量减少。但可降低高血压患者血压。外周阻力增加相对的应该是血压升高,......
受体是什么意思?123
李威客2018-01-14
和激素有什么关系啊!
高中生物教科书上说...抗体是一种受体...我就纳闷了。。这有关系么?都哪和哪啊?我知道抗体是免疫球蛋白,受体是糖蛋白...根本就不是一回事么。。而且作用也一点都不一样。。求解释,顺便望告知高中关于“受体”的知识点。
就是生物学上的受体,α受体、β受体之类的

请教各位大神,我最近在做WB,565KD的蛋白,动物组织的样品,听说样品制备需要蔗糖裂解液,请问这个是必须的嘛?用一般蛋白提取方法制备可以吗?还有电泳和转膜条件能否分享一下。不胜感激

某中药A,体外诱导肿瘤细胞凋亡研究,死亡受体作为主要的凋亡通路,本实验检测到死亡受体通路的FAS,TNF-α,FADD,cleaved-caspase8蛋白的表达都升高,猜想药A可能会通过死亡受体通路诱导细胞凋亡,随后添加caspase8抑制剂,结果却显示细胞死亡率增加,WB结果还未出,理论上应该凋亡受到抑制才对啊?求解!谢谢!!!

要开始实验了,发现好多都是不懂!

引物我打算直接用文献中,但是发现鼠肝细胞和鼠巨噬细胞的引物不同,我就很纳闷了,自噬受体相关基因p62的引物到底从哪里来比较靠谱?