【求助】关于夹心法Elisa标曲的一些疑问,望各位帮忙解答啊
2021-08-10
问题描述:
最近在用夹心法测目的抗体的含量,有很多不解的地方,望各位解答了。
1.标准曲线的标准品是否一定要梯度稀释,为什么?我试过非梯度稀释的,也可以达到线性R2=0.99.
2.我用了CurveExpert做标曲,自动搜索后发现有10种提供的方程,各种形式的,其中一个十分适合我的实验结果(LogisticModel),而其他的感觉又不适合,因为结果常常为负值。这又是为啥捏?
3.实验的酶标仪最大OD值可以测到4,如果我的测量结果在1.3,是否像其他人所说的>1了就不准确了。
4.利用夹心法进行定量分析是否一定要使用线性方程?
不好意思啊,一下问了这么多问题,最近做了一个月的ELISA,完全摸不清头脑啊。谢谢各位了
*请输入10-500个字符
已帮助
0人
0人
迦南之野
用户
1、关于梯度稀释:一般我按照说明书上面的要求梯度稀释,这样做出来和说明书上面的标曲做对比,很清楚知道自己做的准不准,如果差别很大,可以很快的找原因。非梯度稀释没试过,觉得还是按照说明书上来比较好。2、CurveExpert没用过,elisa有很多做标曲的方法吧,我常用回归方程、二次曲线和四参数方程法,一种不太好,就换种方法试试。可能你测的标曲并不好,不会很多种方法都可以用的。3、我们实验室测elisa,OD大于2.5,才认为数据不准。好像说明书上面的标曲数值有大于1的吧。4、夹心法我们实验室一般用线性方法,竞争法用四参数方程,不过上次侧过icllab公司的IgE(夹心法),他们给出的实验方法是四参数方程。我自己知道的也不多。
已帮助
0人
0人
missoulmate
用户
谢谢你啦,这个问题已经克服掉了,种种因素,归结起来就是稀释倍数的问题。夹心法的标曲我也用的是四参数法做的了,不然怕到时候审稿什么的人家不认再。再次感谢
▍
相关分类
▍
相关文章
人血小板生成素(TPO)elisa试剂盒说明书
敌百虫对照品_厂商报价✔
请问一般基因敲除小鼠哪家公司做的好,想问一下时间,周期和价格? ...
购买高级会员 斗云
大鼠基质细胞衍生因子1a(SDF1a)ELISA试剂盒说明书
firstchoice rlm race试剂盒可用于原核生物RNA吗_匿名..._天涯问答
Tsukasa0w0的微博_微博
“单细胞内活性小分子物种检测荧光分析仪”项目过验 实验仪器...
大鼠巨噬细胞炎性蛋白5(MIP5)elisa酶联免疫检测试剂盒使用说明书
兔纤溶酶原激活剂抑制物1 (PAI1)ELISA试剂盒 说明书 ...
给“躺枪”无数的食品添加剂洗白白_食品添加剂仪器社区_仪器信息...
BAELISA.pdf
▍
相关问答