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PromoCell Airway Epithelial Cell Growth Medium is a serum-free medium optimized for the in vitro cultivation of epithelial cells from large air passages.
Although all PromoCell media are optimized for use with primary human cells, we have received feedback from customers that this particular medium can also be used for equine, porcine, murine, bat and rat airway epithelial cells.
To view a list of references where this medium was used with other species/cell types please click here.
Components:
- Growth Medium (Ready-to-use): Includes Basal Medium and SupplementMix
- Growth Medium Kit: Includes Basal Medium and SupplementPack
- SupplementMix: Contains all media supplements premixed in one vial
- SupplementPack: Contains all media supplements as individual vials
Media supplement | Final supplement concentration |
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Bovine Pituitary Extract | 0.004 ml / ml |
Epidermal Growth Factor (recombinant human) | 10 ng / ml |
Insulin (recombinant human) | 5 μg / ml |
Hydrocortisone | 0.5 μg / ml |
Epinephrine | 0.5 μg / ml |
Triiodo-L-thyronine | 6.7 ng / ml |
Transferrin (recombinant human) | 10 μg / ml |
Retinoic Acid | 0.1 ng / ml |
ebiomall.com
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先提取RNA,反转录成cDNA,然后根据目的基因设计PCR引物,通过半定量RT-PCR确定目的基因表达.
正因为检测的是mRNA,所以要先反转录成cDNA才能PCR.
① 在构建载体时,目的基因直接整合到细胞染色体组上,最好不要通过先瞬转在筛选稳定细胞株的这种方法,因为转染效率没有保证
② 高表达载体的构建,哺乳动物表达量一直是它自身的缺点,最好根据高表达载体定向的驯化细胞,提高蛋白表达量
③ 细胞的选择,筛选稳定细胞株我们常用的细胞是CHO,中国仓鼠卵巢细胞,由于CHO具有诸多的优点因此适合用于筛选稳定细胞株,而HEK293细胞则常用于瞬时转染
④ 后期的筛选,双抗预防污染,筛选细胞的时候抗生素浓度一定要做预实验,而且转染的时候不能有抗生素,关于细胞转染 稳定细胞系构建的相关理论
最近因工作需要,欲购进一些生产用的细胞株和瞬转、稳转质粒,大家有什么推荐的品系和公司或网站,谢谢!!!
主要需求:
1.生产或生物制药用的,稳定细胞株如CHO-K1、GS和HEK293/HEK293T,以及与之对应的瞬转、稳转(重组整合)质粒(需详细图谱)。
2.原始或改造细胞株,以及对应质粒,改造细胞株请详述细节,原因,优缺点,安全性等。
3.希望大家积极推荐,实验用、生产用均可,原核、真核都行,网站或品系名称也行,只要大家觉得常用、稳定、安全、高产就行。
4.请有意向的同仁回帖或将详细资料发至我163邮箱:wangqiang23mars@163.com,万分感谢。
然后你得确定,这个细胞株对于你得研究来说不可或缺,具有明确的代表性。
上面两个都没有问题的话,祝你顺利。
如果经费充足的话可以找公司包装病毒,如武汉的普健可以提供各种载体的构建及细胞株构建的技术服务。
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