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【求助】数字PCR
2021-07-28
问题描述:

请问论坛有做数字PCR的吗?为什么用外周血检测突变时,有扩增的微滴才几百个啊?大家一般有效微滴是多少个呢?

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周艳ing
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看来做ddPCR的比较少,用在外周血检测突变方面的更少了
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naizjmx
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你的是什么平台做的啊
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周艳ing
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伯乐的哦
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xzcheng2011
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有的时候是只有几百个,同一批实验有的油滴多有的少
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chaseyy
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我目前再用,做MIRNA的,跑了很对次了,微滴数很多(一般在1.2W-1.6W间),但结果总是不理想。Q200技术说的1W一下不能用吧
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wjf7862203
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周艳ing请问论坛有做数字PCR的吗?为什么用外周血检测突变时,有扩增的微滴才几百个啊?大家一般有效微滴是多少个呢?12000滴以上才算有效
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cypzyf
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周艳ing请问论坛有做数字PCR的吗?为什么用外周血检测突变时,有扩增的微滴才几百个啊?大家一般有效微滴是多少个呢?外周血里面游离DNA的含量比较低,我们做的时候一般在200-400个拷贝每孔。有扩增的微滴就是几百个,这是正常的。但有效微滴数是看总的微滴数,这个一般要求大于1万个,主要是大于1万的结果更稳定可靠一些,小于1万的结果可能也对,但存在一定风险,可能会有偏差。
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心灵茶坊
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周艳ing看来做ddPCR的比较少,用在外周血检测突变方面的更少了你好,我也准备做学样呢,多交流
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l-yannie
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周艳ing请问论坛有做数字PCR的吗?为什么用外周血检测突变时,有扩增的微滴才几百个啊?大家一般有效微滴是多少个呢?有扩增的微滴是指阳性微滴数,也就是表明这个样本中目的基因的拷贝数很低,这在外周血检测突变的实验中是很正常的。有效微滴是指该体系中所有的微滴数,包括阴性和阳性微滴总数,你这个几百只是阳性微滴数,并不是有效微滴数(如下图所示,右上角需要进行勾选你需要查看的微滴类型,一般默认出来的是阳性微滴数)。建议有效微滴数,也就是total超过1w即可
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