数字PCR技术服务
提供商: 卓灏医药 服务名称: 数字PCR技术服务 技术原理:
数字PCR(也可称单分子PCR)包括两部分内容:PCR扩增和荧光信号分析。在PCR扩增阶段,与传统技术不同,数字PCR需要将样品稀释到单分子水平,并平均分配到几十至几万个单元中进行反应。不同于qPCR对每个循环进行实时荧光测定的方法,数字PCR技术是在扩增结束后对每个反应单元的荧光信号进行采集。最后通过直接计数或泊松分布公式计算得到样品的原始浓度或含量。数字PCR的定量方法不依赖于扩增曲线的循环阈值,因此不受扩增效率的影响,也不必采用看家基因和标准曲线,具有很好的准确度和重现性,可以实现绝对定量分析。在未来十年内,医学保健的目标是提供优质高效的个性化医疗。PCR方法会在实现这个目标的过程中发挥重要作用。相比于传统的PCR,数字PCR技术有着无可比拟的优势和广泛的应用前景。
数字PCR检测原理
数字PCR检测流程
应用领域:
- 突变/稀有变异检测(Mutation/Rarevariantdetection)
- 拷贝数变异(Copy-numbervariation)
- 进入外周循环(包括血液和粪便)的肿瘤组织核酸分析
- 无创产前筛查:
- 转化移植检测。
- 药理学(Pharmacogenetics)
- 基因表达分析(Geneexpressionanalysis)-特别针对单细胞或少量细胞或者血清血浆样品
- 线粒体拷贝数分析与线粒体突变分析
- 数字PCR可以验证二代测序(NGS)
应用案例:
- HuggettJF,FoyCA,BenesVetal.(2013)ThedigitalMIQEguidelines:minimuminformationforpublicationofquantitativedigitalPCRexperiments.ClinicalChem6:892–902.
- AbsolutequantificationbydropletdigitalPCRversusanalogreal-timePCRChristopherMHindsonetal.naturemethods|VOL.10NO.10|OCTOBER2013
- DetectionofCancerDNAinPlasmaofEarlyStageBreastCancerPatientsJuliaA.Beaver*1,DanijelaJelovacFebruary19,2014AmericanAssociationforCancerResearch
- EvaluationofaDropletDigitalPolymeraseChainReactionFormatforDNACopyNumberQuantificationLeonardoB.Pinheiro,VictoriaA.Coleman,November28,2011AmericanChemical
- QinJ,JonesRC,RamakrishnanR.Studyingcopynumbervariationsusingananofluidicplatform.NucleicAcidsRes,2008,36(18):e116
- LoYMD,FionaMF,ChanKCA,etal.DigitalPCRforthemoleculardetectionoffetalchromosomalaneuploidy.ProcNatlAcadSciUSA,2007,104(32):13116-13121
- WarrenL,DavidB,IrvingLW,etal.TranscriptionfactorprofilinginindividualhematopoieticprogenitorsbydigitalRT-PCR.ProcNatlAcadSciUSA,2006,103(47):17807-17812
- OttesenEA,JongWH,StephenRQ,etal.MicrofluidicdigitalPCRenablesmultigeneanalysisofindividualenvironmentalbacteria.Science,2006,314(5804):1464-1467
- TadmorAD,ElizabethAO,JaredRL,etal.ProbingindividualenvironmentalbacteriaforvirusesbyusingmicrofluidicdigitalPCR.Science,2011,333(6038):58-62
- TianWang,HongyingSha.,etal.PolarBodyGenomeTransferforPreventingtheTransmissionofInheritedMitochondrialDiseases。Cell157,1591–1604,June19,2014
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发布于 : 2018-08-08
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