细胞形态的观察实验一成纤维细胞微丝的染色
| 实验方法原理 | 微丝普遍存在于多种细胞，对细胞的形状和运动有一定作用。细胞松驰素B可与微丝的亚单位肌动蛋白结合，从而破坏微丝，改变细胞的形状 | ||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 实验材料 | 成纤维细胞 试剂、试剂盒 | PBSTritonX-100M-缓冲液戊二醛固定液考马斯亮兰染液细胞松驰素BDMEM 仪器、耗材 | 光学显微镜镊子平皿载片吸水纸恒温箱 实验步骤 | 一、方法 1. 在平皿中有三张成纤维细胞贴壁生长的盖片，在超净工作台内将一张盖片移入另一皿中继续培养，用作对照。 2. 在有两片的平皿内加100μg/ml的细胞松弛素B4滴继续培养半小时。 3. 将用细胞松弛素B处理过的两张盖片取一张做染色处理，另一张用培养液洗五次（在平皿内换五次培养液，每次都要摇动），继续培养、观察。两小时后细胞形状恢复，接近正常。 4. 对恢复的盖片与第一张没用药的盖片一同做染色处理。 5. 染色处理 （1）将需染色的盖片放入盛有PBS的平皿内用吸管轻轻吹洗盖片，换液三次，每次3分钟，洗去培养液。 （2）将盖片移入2%Triton X-100液，置37℃恒温箱内处理20~30分钟，以提取骨架以外的蛋白质，使骨架图像清晰。 （3）立刻将盖片移入M-缓冲液，换洗三次，每次3分钟。M-缓冲液有稳定细胞骨架的作用。 （4）将盖片移入3%戊二醛固定15分钟。 （5）将盖片移入0.2%考马斯亮兰染液中，染色15分钟。然后小心地用自来水冲洗，空气干燥。 二、结果 1. 光镜观察，微丝聚集成的张力纤维束被染成蓝色。 2. 在没用药的标本上，成纤维细胞多数有突起，微丝沿突起规则排列。 3. 用细胞松驰素B处理的标本，由于微丝被破坏突起缩回，多数细胞形状变圆。 4. 用药处理后又洗去药的标本，由于解除了药的作用，肌动蛋白重新聚台形成微丝，细胞形状恢复正常。 |
免责声明 本文仅代表作者个人观点，与本网无关。其创作性以及文中陈述文字和内容未经本站证实，对本文以及其中全部或者部分内容、文字的真实性、完整性、及时性本站不做任何保证或承诺，请读者仅作参考，并请自行核实相关内容。
版权声明 未经蚂蚁淘授权不得转载、摘编或利用其他方式使用上述作品。已经经本网授权使用作品的，应该授权范围内使用，并注明“来源：蚂蚁淘”。违反上述声明者，本网将追究其相关法律责任。
发布于 ： 2021-08-09
阅读（115）
▍
相关分类
▍
相关文章
小鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(vWF)ELISA试剂盒科研专用_阿...
美国最高法院裁定人类基因不能申请专利_共产党员网
基于频繁模式的蛋白质序列分类资讯
Isaia
适于局部涂敷的预成型薄片器件的制作方法
离心机1g是多少转
Argus II_
Nihonboshitsu Co., Ltd. Aluminium paste, aluminium flake
ProSpecTany品牌简介 ProSpecTany 蛋白;抗体;细胞因子 ...
Frukton – Wikipédia
防弹少年团是有说明书的!阿米们快记住(JHOPE、JIN、SUGA篇)
TWC处理汽车尾气的研究进展
