细胞凋亡的形态:生化性质实验一吖啶橙或溴化乙锭染色
实验方法原理 | |||||||||||
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实验材料 | 细胞 试剂、试剂盒 | 染液 仪器、耗材 | 试管 实验步骤 | 1c)将1μL的染色混合液放至12mm×75mm的玻璃试管的底部。加入25μL细胞悬浮液,用手腕轻柔地混合。 2c)将10μL的该混合液放在一干净的显微镜载玻片上,盖上22mm2的盖玻片。用一落射光显微镜的40×到60×的干物镜和一适合观察荧光素的滤光片结合起来检查。 3c)计数至少200个细胞,记录以下四个细胞状态的每一个数值:①有正常核的活细胞(VN;有结构的亮绿色染色质);②有凋亡核的活细胞(VA;高浓缩或碎片化的亮绿染色质);③正常核的死细胞(NVN;有结构的亮橙色染色质);④有凋亡核的死细胞(NVA;高浓缩或碎片化的亮橙色染色质)。 溴化乙锭只能染死细胞。它插入DNA,使DNA呈现橙色;与RNA的结合很弱,呈现出微红色。因此死细胞有明亮橙色的染色质(溴化乙锭远超过吖啶橙),而且,它的细胞质如果有任何残留,就会呈现深红色。 4c)计算凋亡细胞的百分比(凋亡指数)和坏死的细胞的百分比: 凋亡细胞%=有凋亡核的细胞总数/计数细胞的总数×100% 注意事项 | 其他 | |
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发布于 : 2018-08-06
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